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人抗多发性肌炎硬皮病抗体(PM-Scl;PM-1)elisa试剂盒SPS-13146
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详细内容
人抗多发性肌炎硬皮病抗体(PM-Scl;PM-1)elisa试剂盒试剂盒性能:
1. 检测范围:详见说明书
2. 灵敏度:详见说明书
3. 特:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15%
人抗多发性肌炎硬皮病抗体(PM-Scl;PM-1)elisa试剂盒实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人抗多发性肌炎硬皮病抗体(PM-Scl;PM-1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗多发性肌炎硬皮病抗体(PM-Scl;PM-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
人抗多发性肌炎硬皮病抗体(PM-Scl;PM-1)elisa试剂盒实验所需自备试验器材:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
1.从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。样本不足,或者样本浓度过高,可用样本稀释液做稀释。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算:
绘制标准曲线:以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。