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激光捕获显微切割技术用于1型糖尿病的研究
点击次数：3579 发布时间：2016/8/9 14:16:21
从胰腺细胞中提取RNA具有一定的挑战性，在这里，美国俄亥俄州立大学的科学家Robert Szulawski等提出一种可重复的方法，该方法可以从啮齿动物幼体胰腺细胞中获得充足的、高质量的RNA，用于体外表达研究。组织取自TLR3+/+和TLR3-/-的雌性非肥胖型糖尿病老鼠，该老鼠处于糖尿病前期阶段。组织经液氮冷冻后切片，将组织切片固定在高浓度的酒精溶液中，并用含酒精的甲酚紫溶液染色，再水化作用使得固定切片*小化。激光显微切割系统Leica LMD6000 能够从外形上识别胰腺细胞，并从组织中捕获高浓度的胰腺RNA样品。用胰腺cDNA进行探针法实时定量PCR检测CXC趋化因子配体10，该配体是一种炎症标记物可用于鉴定1型糖尿病。这一方法可作为显微切割技术用于啮齿动物胰腺细胞的典型代表，采用此方法只需要少量的组织便可进行表达研究，且不需要进行RNA的预扩增。利用非肥胖型糖尿病老鼠作为动物模型对于1型糖尿病的研究具有直接意义。
Robert Szulawski，Masato Nakazawa，Kelly D. McCall，Calvin B.L. James，and Frank L. Schwartz，Laser capture microdissection tailored to type 1 diabetes mellitus research，BioTechniques60: 293-298 (August 2016)
原创作者：北京鼎国昌盛
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