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技术文章
离心机分离实例一
点击次数：344 发布时间：2009/5/18 15:20:42
猪肾中微粒体膜组分粗品的分离
仪器与试剂
1.超速离心机（冷冻离心机）和转头
2.匀浆缓冲液。50m mol/L Hepes/NaOH （pH7.4），0.33mol/L蔗糖。
3.重悬缓冲液。10m mol/L Hepes/NaOH （pH7.4）。
方法
1.使用韦林搅拌器（要求4℃预冷）在10倍体积（1L）的匀浆缓冲液（要求4℃预冷），中破碎100g猪肾皮质。
2.将匀浆物在离心机中于8000×g离心15min；
3.小心地转移出上清液，并将其在26000×g离心2min；
4.用重悬缓冲液（要求4℃预冷）重悬离心得到的微体沉淀至蛋白质终浓度约为10mg/ml。这样得到的微粒体沉淀重悬物就是膜结合蛋白质的来源
原创作者：湘仪离心机仪器有限公司
