故障

可能原因

解决方法

（一） 保留时间变化

1 柱温变化

柱恒温，必要时需配置恒温箱

2 等度与梯度间未能充分平衡

至少用10倍柱体积的流动相平衡柱

3 缓冲液容量不够

用>25mmol/L的缓冲液

4 柱污染

每天冲洗柱

5 柱内条件变化

稳定进样条件，调节流动相

6 柱快达到寿命

采用保护柱

（二） 保留时间缩短

1 流速增加

检查泵，重新设定流速

2 样品超载

降低样品量

3 键合相流失

流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向

4 流动相组成变化

防止流动相蒸发或沉淀

5 温度增加

柱恒温

（三） 保留时间延长

1 流速下降

管路泄漏，更换泵密封圈，排除泵内气泡

2 硅胶柱上活性点变化

用流动相改性剂，如加三乙胺，或采用碱至钝化柱

3 键合相流失

同前（二）3

4 流动相组成变化

同前（二）4

5 温度降低

同前（二）5

（四） 出现肩峰或分叉

1 样品体积过大

用流动相配样，总的样品体积小于峰的15%

2 样品溶剂过强

采用较弱的样品溶剂

3 柱塌陷或形成短路通道

更换色谱柱，采用较弱腐蚀性条件

4 柱内烧结不锈钢失效

更换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品

5 进样器损坏

更换进样器转子

（五） 鬼峰

1.进样阀残余峰

每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗

2.样品中未知物

处理样品

3.柱未平衡

重新平衡柱，用流动相作样品溶剂 （尤其是离子对色谱）

4.三氟乙酸（TFA）氧化（肽谱）

每天新配，用抗氧化剂

5.水污染（反相）

通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水

（六） 基线噪声

1 气泡（尖锐峰）

流动相脱气，加柱后背压

2 污染（随机噪声）

清洗柱，净化样品，用HPLC级试剂

3 检测器灯连续噪声

更换氘灯

4 电干扰（偶然噪声）

采用稳压电源，检查干扰的来源（如水浴等）

5 检测器中有气泡

流动相脱气，加柱后背压

（七） 峰拖尾

1 柱超载

降低样品量，增加柱直径采用较高容量的固定相

2 峰干扰

清洁样品,调整流动相

3 硅羟基作用

加三乙胺，用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度，降低流动相PH值，钝化样品

4 同前（四）4

同前（四）4

5 同前（四）3

同前（四）3

6 死体积或柱外体积过大

连接点降至，对所有连接点作合适调整，尽可能采用细内径的连接管

7 柱效下降

用较低腐蚀条件，更换柱，采用保护柱

（八） 峰展宽

1 进样体积过大

同（四）1

2 在进样阀中造成峰扩展

进样前后排出气泡以降低扩散

3 数据系统采样速率太慢

设定速率应使每峰大于10点

4 检测器时间常数过大

设定时间常数为感兴趣峰半宽的10%

5 流动相粘度过高

增加柱温，采用低粘度流动相

6 检测池体积过大

用小体积池，卸下热交换器

7 保留时间过长

等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱

8 柱外体积过大

将连接管径和连接管长度降至*小

9 样品过载

进小浓度小体积样品