Atrazine检测试剂盒
适用
Beacon Atrazine检测试剂盒适用于水中残留Atrazine杀虫剂的定量检测。
检测原理
Beacon公司的Atrazine检测试剂盒由可以和Atrazine及Atrazine酶标记物结合的多克隆抗体制成。样品中的Atrazine与Atrazine酶标记物竞争结合数量有限的抗体结点。测试孔中固定有抗体，用于捕获加入的Atrazine
实验过程中，将样品加入测试孔，之后加入酶标物，酶标物与样品中Atrazine竞争结合抗体得结合点。孵育60分钟后洗掉小孔中所有没有结合的分子。每孔中加入干净的底物溶液，连接的酶结合物可以将底物转化成蓝色化合物，一个酶分子可以转化多个底物分子。
由于各个孔中抗体可结合位点是相同的，并且加入的Atrazine酶标记物的量也是相同的，样品中Atrazine含量低的则酶标记物结合得多，颜色会显深蓝色。反之，样品中Atrazine含量高的则酶标记物结合得少，颜色会显浅蓝色。
注意：颜色与Atrazine的含量成反比。
较深的颜色=较低的浓度
较浅的颜色=较高的浓度
特异性：
Beacon Atrazine 检测试剂盒没有区分Atrazine及其它类型，然而可以不同程度的测到Atrazine其它类型，以下表格中展示的是50% Bo相关值及交叉反映率（%CR），以下所有浓度均为ppb级。

化合物50% Bo%CR
Atrazine0.50100
Prometryne0.12420
Ametryne0.16310
Propazine0.38130
Prometon1.338
Simetryne0.9056
Terbutryne1.436
Simazine6.28.1
Terbuthylazine153.3
De-ethylated atrzine192.6
Cyanazine770.65
De-isopropyl atrazine1200.42
Cyromazine1,6000.031
Melamine〉10,000〈0.005
Diamino atrazine〉10,000〈0.005

以下化合物在10，000 ppb该试剂盒检测不到
AlachlorMetolachlorCarbofuran
Aldicarb2.4-DCarbendazim


精确度
不同时间的四组实验，每组为两个质控样的四个平行样品 .平均精确度如下：
平均值 (ppb)Std. Dev. (ppb)%RSD
质控 I0.0900.01011
质控II3.20.134.1





不同时间的8组实验，每组两个制控样. 平均精确度如下：

平均值(ppb)Std. Dev. (ppb)%RSD
质控 I0.0870.00910
质控 II3.20.123.8
注意
1．不用时请将试剂盒储存于4-8℃。
2．不可冷冻试剂盒，不可使其暴露在大于37℃环境中。
3．开始实验前，所有试剂达到室温。
4．不可使用过期试剂。
5．不同批次的试剂不可混用。
6．使用确证方法确认阳性样品。
试剂盒组成
1．包被有兔抗体的的微孔板 （12×8条）
2．阴性对照品一瓶（0ppb Atrazine）
3．0.05ppb,0.5ppb,5.0ppb 的Atrazine标准品各一瓶
4．1.0ppb Atrazine质量控制液一瓶（瓶上标有精确范围）
5．Atrazine-HRP酶标记物一瓶
6．底物一瓶
7. 停止液一瓶
另需：
酶标仪
薄膜
计时器或表
蒸馏水或去离子水
振荡器
检测程序
1．将所有试剂及样品置于室温下。
2．从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。
3．移取100 µL of 标准品制控和样品至对应微孔, 须每种溶液使用干净的吸头吸取，避免交叉污染。
4. 在每孔种加入 100 µL酶标记物
5. 快速震荡使孔中的溶液混合，并敷上薄膜，或者微孔板可以放在振荡器上震荡孵育，从而达到在孵育期间持续震荡的效果。
6. 孵育 60分钟
7. 孵育完后，去掉封口膜将微孔中的溶液倒入水槽,用冷水充满微孔之后倒掉,如此重复四次,共五次洗板，在吸水纸上拍打，尽可能将水拍干
8. 每个微孔中加入100ul底物溶液。
9. 盖上小孔并孵育30分钟。
10. 按照加底物的顺序每孔中加入100ul停止液。停止液为1 N盐酸，需小心操作。
11. 450nm下读板，如果酶标仪有双波长，可同时测605或650nm双波长。
12. 如果酶标仪可以处理数据，可用半对数线性或4参数曲线拟合，如果为手动计算，则可按照以下部分进行。
计算结果
1．读板之后，求标准，阴性对照，样品的平均吸光度值并按以下方法计算%B0:
2．
标准，阴性对照，样品吸光度值的平均值
%B0 = -------------------------------------------------------
阴性对照的平均吸光值

3．以%B0为Y轴，以Atrazine标准浓度的半对数值为X轴，绘制曲线。
4．通过每个样品的B0%，在图上计算出Atrazine的浓度。
5．如果样品B0%在设定的标准B0%范围之内，就可以得出一个具体的浓度值。如果样品B0%出了范围只能说明样品的浓度大于高浓度的标准或低于低浓度的标准。

质量控制
1.标准品的 %Bo 应在以下范围
Atrazine 标准 (ppb)%Bo 范围
0.0578 - 88
0.546 - 56
5.016 - 27
2. 质控样的值应在瓶外所标范围
样品计算
物质（ppb）OD平均习吸光度值 ± SD%RSD%BoAtrazine 浓度(ppb)
阴性对照 1.5381.523 ± 0.0211.4100.0N/A
1.508
0.05 1.2801.269 ± 0.0151.283.3N/A
1.259
0.5 0.7890.774 ± 0.0222.850.8N/A
0.758
5.0 0.3340.332 ± 0.0020.621.8N/A
0.331

样品0.4280.418 ± 0.0143.427.43.14
0.408




实际值范围可能较大，此数据值仅作为示例
：标准偏差