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立式双层恒温培养摇床策略的选择
立式双层恒温培养摇床在分批补料培养过程中,高密度发酵成功的关键是补料策略的选择。一般来讲,对于补料,不同的发酵菌株有不同的发酵依据。通常情况下,都是以一般用菌的形态、发酵液中的糖浓度、液体溶氧浓度、尾气中的氧和二氧化碳含量、摄氧率或呼吸商的变化作为依据的。
在发酵培养中,普遍因不能耐受温度、pH和溶液浓度等极端工艺条件而使其应用受到限制,尤其是受到积聚代谢产物的抑制。由于发酵中产生了大量的代谢物,立式双层恒温培养摇床所以需要调整pH,加人大量碱液,这样就导致了营养培养基的稀释;而若以葡萄糖为主要基质,由于浓缩程度有限,在高细胞密度补料时也会发生培养基的稀释,这些问题都影响了细胞的生长。
分批补料培养至一定程度时,限定培养基中碳源趋于耗尽。溶氧与pH回升是葡萄塘耗尽的信号,此时则需补料以维持菌体生长。立式双层恒温培养摇床恒速补料并不能满足逐渐增加菌体的生长需求(Allen.1987),所以提出少量多次增加的补料方式可使葡萄糖和乙酸盐在补料问隔中被完全吸收,从而获得更稳定的生长速率。
近年来,补料的方法、时机和数量以及料液的成分、浓度都曾有相关的报道。采用一次性大量补料虽然操作简便,但是此方法会使发酵液组分瞬时改变,扰乱菌的生理代谢.立式双层恒温培养摇床难于控制菌体的*适生长状态。少量多次补料方法虽然操作麻烦·但是此法比一次补料合理,更易于控制菌液中菌体的生长状态。如果条件允许,可以通过计算机进行在线监控,按照实际发酵液需要合理及时地流加补料。
上述四个阶段延续的时问与选用菌种和培养条件(包括种子的培养过程)均有密L刃关系,我们可以根据自己的实际情况,摸索合理的培养条件,确定自己的操作参数。如果原料和培养条件发生改变,操作参数也要随之调整。
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