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微生物乳球菌抗性恒温摇床实验过程

点击次数：339 发布时间：2012/6/4

乳酸菌作为发酵剂应用于乳制品工业的历史悠久，但发酵过程一直受到噬菌体的威胁，恒温摇床成为影响乳制品质量的顽固问题。噬菌体感染具有宿主专一性，而乳酸乳球菌是噬菌体的易感菌群，当受到噬菌体感染时，菌株产酸能力降低，甚至导致发酵失败。噬菌体感染主要包括吸附、DNA侵入、体内增殖及成熟噬菌体颗粒释放等过程。

自1940年抗生素使用以来，很多病原微生物产生了抗药性，目前已经鉴定的抗药机制包括改变药物靶位点、对药物修饰以降低药物进入细胞靶点的通路等。在很多微生物中都发现有一些药物不能进入细胞或活性药物排出系统。

在长期的生物进化过程中，恒温摇床乳球菌自身编码了一些抗噬菌体感染机制，如噬菌体吸附障碍、DNA浸入抑制、限制修饰系统和流产感染等。利用分子生物学技术，构建乳球菌抗噬菌体工业菌株为解决乳制品发酵过程的噬菌体感染提供了一条有效途径。

利用弱化细胞壁合成的物质制备的感受态细胞，比用溶菌酶处理的细胞转化效率高，并且细胞的存活率也高，因为残存的细胞壁成分，更有利于转化后细胞的复苏和存活。溶菌酶处理的细胞电转后易破裂，导致纲胞死亡。乳酸菌在营养丰富的培养基上，生长迅速，时间内达到生长稳定期。如在培养基内加入削弱细胞壁合成的物质，因细胞壁合成不完整，不能满足细胞质的快速增长的需要而导致细胞破裂死亡。恒温摇床如果在培养基中同时加入维护细胞膜渗透压的稳定剂，即可提高电转化效率。在蔗糖存在时，加入3％甘氨酸，菌株仍能生匠，并且制备的感受态细胞的转化效率较高。年在研究乳杆菌电转化条件时发现，向培养基中加入适当浓度的氨苄青霉素，可以提高感受态细胞的转化效率。

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