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食品级重组体的恒温摇床酶活性
Joutsjoki等(2002)模拟干酪成熟过程的恒温摇床环境,对肽酶活性进行了研究。以I一-赖氨酸硝基苯胺为底物测定PepN、PepC的活性,以L,甘氨酸脯氨酸硝基苯胺为底物测定PepX的活性,脯氨酸硝基苯胺为底物测定PepI的活性。PepN的反应条件是50mmol/L Tri~HCI,pH7.5,45℃;PepC的反应条件是50mmol/L Tris—HCI,H7.0,40℃;PepX的反应条件是50mmol/L MES,pH6.5,恒温摇床45℃;PepI的反应条件是50mmol/L Tris—HCl,pH7.5,37℃。在测定PepC时,用5mmol/L EDTA抑制PepN的活性。同时在模拟干酪成熟条件下(4%NaCI、125mmol/L CaCle、pH5.2)测定肽酶的活性。
含有pepN、pepC、pepX和pepI基因的转化子乳酸乳球菌DN209在不含嘌呤的合成恒温摇床培养基上培养17h后,菌体内的肽酶活性显著增加(表4-3)。含肽酶基因的乳酸乳球菌NMl在牛乳培养基上尽管比乳酸乳球菌DN209的稍低,但其肽酶活性明显增加。