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微生物发酵恒温摇床流程化操作

点击次数：465 发布时间：2012/6/14

    微生物发酵恒温摇床通常会碰到产物抑制问题，在乳酸发酵中产物（乳酸）抑制现象严重。负的酵母，可产生较高水平的乳酸。克雷布特里效应是指培养基中葡萄糖浓度增加所引起的对细胞呼吸作用中氧消耗的抑制现象，而氧浓度的增加抑制糖酵解作用，降低乳酸堆积，亦即巴斯德效应。另一个优点是目前已具备这类酵母的遗传操作方法，可进行流程化操作。

    提高菌种耐受其自身产物乳酸的能力即耐低pH对乳酸发酵至为重要。在低pH环境中生长涉及多个散落在染色体上各处的基因位点，经插入突变方法分离得到的乳酸乳杆菌抗酸性突变型特性的分析表明，有多达18个不同的基因位点及多种抗低pH的机制存在。在恒温摇床乳杆菌对酸性的适应能力的蛋白质组学分析已鉴别出63种协调诱导的不同的蛋自质。

Porr0等（1999）研究了L乳酸脱氢酶基因在酵母菌中的表达。作者把基因引入野生型乳酸克鲁维酵母中，观察到工程酵母菌可积累乳酸，但同时生成乙醇。作者重新构建了酵母菌的恒温摇床细胞代谢途径，把基因引入缺失丙酮酸脱羧酶基因的中，由于缺乏丙酮酸脱羧酶基因，该工程菌合成乙醇的代谢途径受阻，代谢途径流向乳酸合成。所得乳酸浓度为109g／L，产率为0．91g／，转化率为乳酸消耗的葡萄糖。选择酵母的优点是可在比细菌更低的pH环境中生产有机酸。另外，常用的酿酒酵母。

有3个丙酮酸脱羧酶基因，而这种乳酸克鲁维酵母只有1个PDC基因，容易进行遗传操作。同时乳酸克鲁维酸母又是所谓克雷布特里效应。

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