细胞培养液选配关注点

点击次数：199 发布时间：2016/7/26 9:24:13

培养液是人工模拟细胞体内生长的生存环境，对于细胞培养起着关键性作用。

1. 选择培养基没有一定的标准，某种培养基可以适合多种细胞，某种细胞也可以在不同培养液中生长。但是，建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。

2. 1640的确是非常便宜的培养基，也很好用。但是，它的缓冲力*弱，所以有时会对细胞的生长状态有影响，尤其是一些实验室长期传代状态不好的细胞。有条件还是用DMEM培养基。

3. 一旦在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，放入4度冰箱。应该在2到3周内用完它。因为，一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。2-3周后就降解完了。

4. 培养基的pH值随着碳酸氢钠量的增加，呈抛物线增长，当碳酸氢钠加到一定量时，pH变化越来越小。而培养基的渗透压值随着碳酸氢钠量的增加，呈直线增长，碳酸氢钠量越大，渗培养基变成了高渗溶液，细胞会脱水萎缩滴。（ATCC 推荐大部分细胞添加碳酸氢钠为1.5g/L）

5. 胎牛血清必须贮存于–20 ～ -70℃，若存放于4℃，2～3周就降解了。可将1瓶500ml的血清，每次40～45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中。

6. 血清的解冻和细胞的解冻正相反：细胞是越快越好；血清是越慢越好。血清解冻步骤: -20℃或–70℃冰箱拿出来，放到4℃冰箱，放一天，慢慢融化。

7. 进口的胎牛血清，一般不需要热灭活，因为会造成沉淀物显著增多，且会影响血清的品质。这些沉淀物在显微镜下观察，像是“小黑点”，常常误以为是血清遭受污染。

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