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质粒纯化试剂盒(中提)
HiSpeed Plasmid Midi Kit
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详细信息
性能
HiSpeed Plasmid Kits提供QIAfilter Cartridges、HiSpeed Tips和QIAprecipitator模块,用于快速、大规模的制备质粒。针筒规格的QIAfilter和QIAprecipitator模块取代了传统阴离子交换过程中的离心操作,使质粒纯化更加方便、快捷。可从50–150 ml的培养体积中纯化多至750 µg的高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基)。HiSpeed Tip支持高流速,确保更快地完成DNA结合、洗涤和洗脱。
此外,HiSpeed tips中新型的阴离子交换树脂广泛用于核酸的纯化。HiSpeed Midi tips可获得多至200 µg的高拷贝质粒。其独特的分离特性使得到的DNA的纯度相当于两次氯化铯梯度离心处理得到的纯度。
原理
QIAfilter Cartridges是一种特制的过滤器,专用于取代细菌细胞碱裂解之后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可去除SDS沉淀,只需很短的离心时间即可澄清细菌裂解液。预装的HiSpeed tips依靠重力流运行,确保不会流干,降低了质粒制备的手工操作时间。
独特的QIAprecipitator模块取代了异丙醇沉淀后传统的离心法纯化DNA 。异丙醇混合液流过QIAprecipitator的时候DNA会结合上去,然后用TE缓冲液或水将DNA从QIAprecipitator洗脱下来。这一独特的模块降低了离心后转移上清液过程丢失DNA的风险。
操作流程
经中和的细菌裂解液放入QIAfilter Cartridge 中,几秒内过滤澄清。滤出液放至HiSpeed tip 进行质粒DNA 纯化。洗脱所得DNA与异丙醇混合并用注射器装入QIAprecipitator 中。经浓缩和脱盐后,直接从QIAprecipitator上用TE 缓冲液或水洗脱。
应用
HiSpeed Plasmid Kits纯化得到超纯转染级纯DNA,适合于多种应用,包括:克隆、测序、转染和质粒介导的基因沉默等。
技术参数
特点 | 参数 |
Applications | Transfection, cloning, sequencing, gene silencing |
Culture volume/starting material | 50 µl – 150 ml culture volume |
Plasmid type | High-copy, cosmid DNA |
Processing | Manual (filtration) |
Samples per run; throughput | 1 sample per run |
Technology | Anion-exchange technology |
Time per run or prep per run | <45 min |
Yield | <200 µg |
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