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质粒大量提取试剂盒
QIAGEN Plasmid Maxi Kit
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QIAGEN Plasmid Kits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级纯质粒DNA,可制备至多500 μg的质粒DNA。离心获得澄清的裂解液和异丙醇沉淀。
详细信息
QIAGEN Plasmid Kit实验流程。
将中性细菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge内孵育,数秒内即可过滤澄清。然后将澄清的裂解物上样至阴离子交换纯化柱,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA会选择性地结合上去。利用中盐浓度的洗涤液去除RNA、蛋白质、代谢物及其他低分子量杂质,使用高盐缓冲液洗脱超纯的质粒DNA。利用异丙醇沉淀对DNA进行浓缩并脱盐,并通过离心收集。
性能
QIAGEN Plasmid Maxi Kits利用重力流QIAGEN-tip 500阴离子交换柱高效纯化质粒DNA。可从100–500 ml培养液中纯化多至500 µg高拷贝质粒DNA(培养液容量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基)。QIAGEN Plasmid Kits纯化得到的质粒DNA适用于转染、克隆和体外转录等多种应用。
原理
QIAGEN-tips内独特的阴离子交换柱专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits直接离心澄清细菌裂解液。澄清后的裂解液上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯化质粒DNA。纯化得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,离心收集。
技术参数
特点 | 参数 |
Applications | Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc. |
Culture volume/starting material | 100–500 ml culture volume |
Plasmid type | High-copy, low-copy, cosmid DNA |
Processing | Manual (centrifugation) |
Samples per run; throughput | 1 sample per run |
Technology | Anion-exchange technology |
Time per run or prep per run | 160 min |
Yield | <500 µg |
【公司名称】 广州健仑生物科技有限公司
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数量 | 产品 | 价格 |
QIAGEN Plasmid Maxi Kit (10) 10 QIAGEN-tip 500, Reagents, Buffers | 询价 | |
QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25) 25 QIAGEN-tip 500, Reagents, Buffers | 询价 | |
QIAGEN Plasmid Maxi Kit (100) 100 QIAGEN-tip 500, Reagents, Buffers | 询价 |