企业档案
会员类型：会员
已获得易推广信誉 等级评定
41成长值
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
易推广会员：14年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号：**** 【已认证】
法人代表： 【已认证】
企业类型：经销商 【已认证】
注册资金：人民币**万 【已认证】
产品数：10849
参观次数：4961263
手机网站：http://m.yituig.com/c58091/
旗舰版地址：http://www.knbio.net
质粒
酶联免疫试剂盒
- 鹿类ELISA试剂盒
- 猴子ELISA试剂盒
- 鱼类ELISA试剂盒
- 羊类ELISA试剂盒
- 其它ELISA试剂盒
- 人ELISA试剂盒
- 豚鼠ELISA试剂盒
- 小鼠ELISA试剂盒
- 大鼠ELISA试剂盒
- 犬ELISA试剂盒
- 牛ELISA试剂盒
- 马ELISA试剂盒
- 兔子ELISA试剂盒
- 鸭类ELISA试剂盒
- 鸡ELISA试剂盒
- 植物ELISA试剂盒
- 猪elisa试剂盒
瘦肉精试剂盒
沉淀试剂盒
细胞分选试剂盒
技术服务
生化试剂盒
实验耗材
PCR板
PCR管
sigma试剂
实验代做技术服务,实验整体外包
对照品/标准品
抗体
Axygen耗材
细胞
金标试纸条
金标渗滤卡
金标层析卡
细胞生物学检测
技术文章
市场推送：果糖-6-磷酸（F6P）含量试剂盒说明书微板法@2024实验室动态
点击次数：35 发布时间：2024/9/12 10:17:59
果糖-6-磷酸（F6P）含量试剂盒说明书
（货号:WS8780W 微板法 96 样）
一、产品简介：
果糖-6-磷酸(F6P )是糖代谢和糖异生途径的中间产物，广泛地存在于动植物和微生物体
中。
本试剂盒提供一种简单，灵敏，快速的测定方法：果糖-6-磷酸（F6P）在磷酸葡萄糖异
构酶和磷酸葡萄糖脱氢酶的相继作用下使 NADP+还原成 NADPH，通过检测 NADPH 在
340nm 处的增加量即可计算得出样品中的 F6P 含量。
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉体 mg×1 支
4℃保存
用甩几下或离心使试剂落入底部，再加
1.2mL 蒸馏水溶解备用。
试剂二
粉体 mg×1 支
-20℃保存
用甩几下或离心使试剂落入底部，再加
1.2mL 蒸馏水溶解备用。用不完的液体试
剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三
液体 16mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体 μL×1 支
-20℃保存
用甩几下或离心使试剂落入底部，再加
1.1mL 蒸馏水溶解备用。用不完的液体试
剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
仅用来鉴定试剂盒中试剂是否正常（不参
与结果计算）。
使用方法：用标准管（F6P）甩几下使粉
剂落入底部，再加 0.5mL 蒸馏水混匀溶解
即 浓 度 为 20μmol/mL, 再稀释 20 倍 成
1μmol/mL 的 F6P 后备用；按照加样表中测
定管操作（样本更换成备用浓度标准品）。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液器、研钵、水浴锅、冰和蒸馏水。
四、果糖-6-磷酸（F6P）含量测定：
1、样本制备
① 组织样本：
建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。12000rpm, 4℃离心 10min，
取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可以按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例提取。
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
③ 液体样本：直接检测。2
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm。
② 试剂解冻至室温（25℃），或可放在 25℃条件下水浴 5-15min。
③ 试剂一和二和三可按照 10:10:150 比例配成混合液（一枪加 170μL 该混合液）（该混合液
用多少配多少，现配现用）。
④ 在 96 孔板中按照下表依次加入试剂：
试剂名称（μL）
测定管
空白管（仅做一次）
试剂一
10
10
试剂二
10
10
试剂三
150
170
样本
20
混匀，于室温（25℃）下孵育 20min 后于 340nm 处读取 A1（若 A
值继续增加，需延长孵育时间，直至 2 分钟内吸光值不变）。
试剂四
10
10
混匀，于室温（25℃）下孵育 20min 后于 340nm 处读取 A2（若 A
值继续增加，需延长孵育时间，直至 2 分钟内吸光值不变），
△A=（A2-A1）测定-（A2-A1）空白。
【注】若△A 的差值在零附近徘徊，可增加样本量 V1（如增至 100μL，则试剂三相应减少，保
持总体积不变），或增加样本取样质量 W，则改变后的 V1 和 W 需代入公式重新计算。
五、结果计算：
1、按样本重量计算：
F6P 含量(µg/g 鲜重)=[(ΔA÷(ε×d)×V2×106×Mr]÷(W×V1÷V)×D=836×ΔA÷W×D
2、按细胞数量计算：
F6P 含量(μg/104 cell)=[(ΔA÷(ε×d)×V2×106×Mr]÷(500×V1÷V)×D=1.7×ΔA×D
3、按照液体体积计算：
F6P 含量(µg/mL)=[(ΔA÷(ε×d)×V2×106×Mr]÷V1=836×ΔA
ε－－-NADH 摩尔消光系数，6.22×103 L/mol/cm； d－－-96 孔板光径，0.5cm；
V－－-加入提取液体积，1 mL；
V1－－-加入样本体积，0.02mL；
V2－－-反应总体积；0.2mL=2×10-4 L；
W－－-样本质量，g；
Mr－－-果糖-6-磷酸（F6P）分子量；260；
500－－-细胞数量，万；
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1。
原创作者：上海瓦兰生物科技有限公司
相关产品
-
电议 型 号： -
电议 型 号：
-
电议 型 号：48T/96T
-
电议 型 号：48T/96T
-
电议 型 号：48T/96T
