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生物行情:植物总酚(Total Phenols,TP)试剂盒说明书@2024实验室动态

点击次数:10 发布时间:2024/9/14 9:43:42

 

植物总酚(Total PhenolsTP)试剂盒说明书
(货号:WS8424F 分光光度法 50 /24
注意:正式测定之选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
植物酚类物质具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作
用而广泛应用于化妆品、食品、医药等域。
测定原理
在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在 760nm 处有特征吸收峰,
760nm 处的吸光值,即可得样品总酚含量。
自备实验用品及仪器
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1 mL
玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:60%乙醇,自备。
试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
总酚提取
将样本烘干至恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0.1g,加入 2mL 提取液,60℃振荡提
2h10000g25℃,离心 10min,取上清,用提取液定容至 2mL,待测。
测定操作表
对照管
测定管
样本待测液(µL
50
50
试剂一(µL
250
混匀,25℃静置 2min
试剂二(µL
250
250
H2OµL
700
450
混匀,25℃静置 10 min,蒸馏水调零,1mL 比色皿分别测定 760nm 下测定管和对照管吸光
值,ΔA=A 测定-A 对照,每个测定管设一个对照管。
总酚含量计算公式
标准曲线:y = 5.615x+0.0012R2 = 0.9994
总酚含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0012÷5.615×V ÷(V ÷V 样总×W)
= 0.356×(ΔA– 0.0012 )÷W
V 样总:加入提取液体积,2mL V 样:反应中样品体积,0.05mL W:样品质量,g
注意事项
1. 吸光值大于 2,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂一对皮肤有一定的刺激性,请操作时做好防护措施。
3. di检出限为 2.4 μg/g

原创作者:上海瓦兰生物科技有限公司

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