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蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)微板法
价格：￥200
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：96T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/7 11:01:18更新时间：2024/10/30 9:31:18
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：156
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
双缩脲法蛋白含量测定试剂盒说明书
(货号：WS2340W 微板法 96 样)
一、产品简介：
在碱性溶液中，凡分子中含二个或二个以上酰胺基(—CO-NH2)或与此相似基团的化合
物均与二价铜离子作用，络合物呈紫色，这一反应称双缩脲反应。蛋白质分子含有众多肽
键(—CONH—)，可发生双缩脲反应，且呈色强度在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比，
经光谱扫描 540nm 为大吸波长。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂 A
液体 9mL×1 瓶
4℃避光保存
依据实验用量，临用试剂
A:B:超纯水=5:3:2 的比例混匀
成反应 mix，4℃避光保存两周。
试剂 B
液体 5.5mL×1 瓶
4℃保存
标准品
液体 1mL×1 支
4℃保存
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、恒温水浴锅（恒温培养箱）、移液器和蒸馏水。
四、蛋白含量测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心 10min，取上清，
即待测液。
② 细菌或细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液；
超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），
12000rpm，4℃离心 10min，取上清，即待测液。
③ 液体样本：澄清无色液体样品可以直接测定。若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测
① 酶标仪预热 30min，调节波长到 540 nm，蒸馏水调零。
② 可先取 2 个样本预测，确定适合本批样本的浓度，若需要可用蒸馏水进行稀释，稀释
倍数 D 代入公式计算。
③ 在 2mL 的 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
标准管
（只做一次）
空白管
（只做一次）
样本
20
标准品
20
蒸馏水
20
反应 mix
180
180
180
混匀，于 37℃保温 10min，全部转移到 96 孔板，
于 540nm 处测定吸光值 A，△A= A 测定-A 空白。本试剂盒仅供科研使用
2
五、结果计算：
1、蛋白含量(mg/g 鲜重)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(W×V1÷V)×D
=10×△A÷(A 标准-A 空白)÷W×D
2、蛋白含量 (mg/mL)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V)×D
=10×△A÷(A 标准-A 空白)×D
3、蛋白含量(μg/104 cell))=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×500)×D
=0.02×△A÷(A 标准-A 空白)×D
C 标准－－-蛋白标准品浓度，10mg/mL；
V－－-提取液体积：1mL；
V1－－-加入粗提液体积：0.02mL；
W－－-样本质量：g；
D－－-稀释倍数；
500－－细菌或细胞总数，500 万。
注意事项：
1 本法可测定范围为 1-10mg 蛋白质，适用于精度不高的蛋白质含量测定。
2 硫酸铵、Tris 缓冲液、EDTA、PVP 和一些氨基酸等物质会对测定造成干扰。
3 工作液长期放置后若有暗红色沉淀出现，即不能使用。
热门标签：蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)
