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肉桂酸4-羟基化酶(C4H)试剂盒微板法
价格：￥1660
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：96T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/7 15:06:10更新时间：2023/11/30 10:20:15
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：163
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
肉桂酸 4-羟基化酶（C4H）试剂盒说明书
（货号：WS1001W 微板法 96 样）
一、产品简介：
肉桂酸-4-羟基化酶（C4H，EC 1.14.13.11）是苯丙烷类代谢途径的关键酶。可有效调节
与之相应的黄酮类化合物等次生代谢产物的合成，其活性可作为植物抗性的一个生理指标。
本产品测试原理是以肉桂酸作为底物，在酶促反应的适条件下，肉桂酸-4-羟基化酶催
化底物生成 4-羟基反式肉桂酸，其在佳 PH 值下，产物 4-羟基反式肉桂酸在 340nm 下有
大吸收峰，进而计算出该酶活性大小。
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
试剂规格
保存方式
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 5mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂×2 瓶
-20℃保存
用甩几下使粉剂落入底部，
每瓶再加 20mL 蒸馏水溶解，用
不完的试剂分装后-20℃保存，
禁止反复冻融，一周内用完。
试剂三
液体 30mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体 5mL×1 瓶
4℃保存
试剂五
液体 6mL×1 瓶
4℃保存
三、所需用的仪器与用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
四、肉桂酸 4-羟基化酶（C4H）活性检测：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
称取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.5g），加入 1mL 提取液组织，进行冰浴匀
浆。12000rpm, 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂（μL）
测定管
空白管（仅做一次）
样本
100
试剂一
50
50
试剂二
350
350
试剂三
300
400
混匀，30℃水浴反应 30min
试剂四
50
50
混匀，静置 2min
试剂五
60
60
混匀后，取 200μL 转移至 96 孔板，在 340nm 下读取
吸光值 A，△A=A 测定-A 空白。本试剂盒仅供科研使用
2
【注】若△A 的值在零附近徘徊，可增加样本加样量（如增加至 200μL，则试剂三相应减少）
或增加反应时间 T，则改变后的加样体积 V1 和 T 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1. 按样本鲜重计算：
酶活定义：每克组织每分钟产生 1nmol 的 4-羟基反式肉桂酸为一个酶活力单位。
C4H（nmol/min/g 鲜重）=[(△A÷ε÷d×V2×109) ]÷(W×V1÷V)÷T
=24.8×ΔA÷W
3. 按样本蛋白浓度计算：
酶活定义：每毫克组织蛋白每分钟产生 1nmol 的 4-羟基反式肉桂酸为一个酶活力单位。
C4H（nmol/min/mg prot）=[(△A÷ε÷d×V2×109) ]÷(V1×Cpr) ÷T
=24.8×ΔA÷Cpr
ε －－-4-羟基反式肉桂酸在此反应条件下于 340nm 处的摩尔吸光系数，2.45×104 L/mol /cm；
V－－-加入提取液体积，1 mL；
V1－－-加入样本体积，0.1 mL；
V2 －－-反应体系总体积，910μL=9.1×10-4 L；
d －－96 孔板光径，0.5 cm；
T－－-反应时间，30 min；
W－－-样本质量，g；
Cpr－－-样本蛋白质浓度，mg/mL；建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
热门标签：肉桂酸4-羟基化酶(C4H)试剂盒
