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糜蛋白酶试剂盒/胰凝乳蛋白酶试剂盒微板法
价格：￥1120
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：96T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/7 15:29:27更新时间：2024/6/7 8:42:35
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：160
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
糜蛋白酶/胰凝乳蛋白酶（Chymotrypsin）试剂盒说明书
(货号：WS1121W 微板法 96 样)
一、产品简介：
糜蛋白酶（EC 3.4.21.1）又称胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一种蛋白水解酶，具有肽链
内切酶的作用，通过切断蛋白质肽链中酪氨酸、苯丙氨酸的羧端肽链作用，一水解羧端芳
香族氨基酸。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化，对脓性和非脓性痰液均有效；也用于创伤或手
术后伤口愈合。
本试剂盒采用糜蛋白酶催化水解 N-琥珀酰-丙酰氨-丙酰氨-脯酰氨-苯丙氨酸对硝基酰苯
胺（SAAPFpNA）生成对硝基苯胺，后者在 405nm 有大吸收峰，通过测定吸光值升高速
率即可得出糜蛋白酶的活性大小。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存条件
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 15mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 0.6mL×1 支
-20℃保存
若凝固则可于 37℃水浴至融化，
再加 3.8mL 蒸馏水混匀备用。
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
若重做标曲，则用到该试剂。
三、所需的主要仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液器、天平、研钵、冰和蒸馏水。
四、糜蛋白酶/胰凝乳蛋白酶活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实
验样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。4℃×4000rpm 离心 5min，取上
清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
② 液体样本：若是澄清液体，直接检测，若液体样本浑浊，需 4℃×12000rpm，离心 10min，
取上清液检测。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 405nm。
② 所有试剂解冻至室温。在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
样本
30
试剂一
130
试剂二
40
混匀， 立即于 405nm 处测定吸光值 A1，37℃
条件下反应 5min 后读取 A2，ΔA=A2-A1。本试剂盒仅供科研使用
2
【注】1 .若ΔA 在零附近徘徊，可以延长反应时间 T（如延长至 10min 后读取 A2）或增加样本量 V1（如增
至 60μL，则试剂一相应减少），则改变后的反应时间 T 和样本量 V1 需代入计算公式重新计算。
2. 若ΔA 大于 0.5，可缩短反应时间 T（如缩至 2min 后读取 A2）或减少样本量 V1（如减至 10μL，
则试剂一相应增加），则改变后的反应时间 T 和样本量 V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、标准曲线：y = 0.0259x - 0.001：x 为标准品(nmoL)，y 为ΔA。
2、按样本鲜重计算：
单位定义：每克组织每分钟催化产生 1nmoL 对硝基苯胺为一个酶活单位（U）。
糜蛋白酶/胰凝乳蛋白酶(nmoL/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.001)÷0.0259]÷(W×V1÷V)÷T
=257.4×(ΔA+0.001)÷W
3、按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每毫克组织蛋白每分钟催化产生 1nmoL 对硝基苯胺为一个酶活单位（U）。
糜蛋白酶/胰凝乳蛋白酶(nmoL/min/mg prot)=[(ΔA+0.001)÷0.0259]÷(V1×Cpr)÷T
=257.4×(ΔA+0.001)÷Cpr
4、按照液体体积计算：
单位定义：每毫升液体每分钟催化产生 1nmoL 对硝基苯胺定义为一个酶活单位（U）。
糜蛋白酶/胰凝乳蛋白酶(nmoL/min/mL)=[(ΔA+0.001)÷0.0259]÷V1÷T=257.4×(ΔA+0.001)
V－－-加入提取液体积，1 mL；
V1－－-加入样本体积，0.03 mL；
W－－-样本质量，g；
T－－-反应时间，5min；
Cpr－－-样本蛋白质浓度，mg/mL；建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒；
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（50μmol/mL）：临用甩几下或离心，使粉体落入底部，加入 0.5mL
乙醇，涡旋震荡溶解后再加入 0.5mL 的蒸馏水混匀，得到 50μmol/mL 备用。
2 用蒸馏水把母液稀释成以下浓度：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1μmol/mL。也可根据实际来调
整浓度。
3 30μL 标准品+170μL 试剂一，混匀后于 405nm 处读取 A 值，依据结果即可制作标准
曲线。
热门标签：糜蛋白酶试剂盒/胰凝乳蛋白酶试剂盒
