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游离胆固醇(FC)含量试剂盒微板法
价格：￥410
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：96T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/7 15:38:54更新时间：2023/11/8 9:25:37
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：167
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
游离胆固醇（free cholesterol, FC）含量试剂盒说明书
（货号：WS1190W 微板法 96 样）
一、产品简介：
游离胆固醇（FC）不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸，维生素 D 以及甾体激素
的原料。其血清浓度可作为脂代谢的指标。
游离胆固醇（FC）在胆固醇氧化酶作用下被氧化生成 4-胆甾烯酮和 H2O2；接着与 4-
氨基氨替吡啉等反应生成红色醌类化合物，其在 510nm处有特征吸收峰，通过检测 510nm
处吸光值即可得出 FC 含量。
二、试剂盒的组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉剂 mg×1 支
4℃保存
用甩几下使试剂落入底部，再
加 3.2mL 蒸馏水，充分震荡溶解
试剂二
液体 9mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
液体 6mL×1 瓶
4℃保存
标准品
液体 1mL×1 支
4℃保存
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调式移液枪、水浴锅、离心机、研钵、蒸馏水。
四、游离胆固醇（FC）含量测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
称取约 0.1g 组织样本加入研钵中，加入 1mL 提取液，在冰上进行匀浆，12000rpm，
4℃或室温离心 10min，取上清液待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液(mL)为 1：5~10 的比例进行提取。
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
③ 液体样本：澄清的液体样本直接测定，若浑浊则离心后取上清检测。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30 min，调节波长到 510 nm。
② 所有试剂解冻至室温（25℃）。
③ 在 96 孔板中依次加入：
试剂名称（μL） 测定管
标准管
（仅做一次）
空白管
（仅做一次）
标准品
40
样本
40
试剂一
30
30
30
试剂二
70
70
110本试剂盒仅供科研使用
2
试剂三
60
60
60
混匀，避光孵育 60min，于 510nm 处读取各管吸光值 A。
【注】若测定管的 A 值大于 1，则需将样本进行稀释（用提取液稀释）或减少样本加样量 V1（如减至 20μL，
则试剂二相应增加），稀释倍数 D 或样本量 V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、按样本质量计算
FC（μg/g 重量）=(C 标准×V2) ×Mr×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(W×V1÷V) ×D
=193.3×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ÷W×D
2、按细胞数量计算：
FC（μg/104 cell）=(C 标准×V2) ×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(500×V1÷V) ×D
=0.39×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ×D
3、液体中 FC 含量计算：
FC（μg/mL）=(C 标准×V2) ×Mr×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
=193.3×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)
C 标准－－-0.5μmol/mL；
Mr=386.6－－-胆固醇分子量；
V1－－-样本加入体积，0.04mL；
V2－－-标准品加入体积，0.04mL；
V－－-提取液体积，1mL；
D－－-稀释倍数；
500－－-细胞数量；
W－－-样本取样质量。
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