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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

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尿酸(UA)含量试剂盒(尿酸酶比色法)微板法

价格:¥170

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号:96T 原产地:中国大陆 发布时间:2023/11/8 10:07:56更新时间:2024/11/20 8:38:02

产品摘要:我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多,质量好,灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测(为您节省时间)具体价格请lai电咨询

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详细内容

本试剂盒仅供科研使用
尿酸含量(尿酸酶法)检测试剂盒说明书
(货号:WS2021W 微板法 96 样)
一、产品简介:
尿酸是嘌呤代谢的终产物,并通过肾脏过滤排泄到尿液中。许多肾脏疾病会影响尿
酸水平,所以尿酸测定在诊断和评估肾脏疾病中具有重要作用。
本试剂盒利用尿酸酶特异作用于尿酸,氧化产生的产物与显色剂反应呈现的(粉)红
色,该有色物质在520nm有大吸收峰,进而计算得到尿酸含量。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 110mL×1
4℃保存
试剂一
液体 14mL×1
4℃保存
试剂二
液体 8mL×1
4℃保存
试剂三
粉体 mg×1
-20℃保存 临用甩几下使粉体落入底部
,再
1.1mL 的试剂一溶解备用。
标准管
粉体 mg×1
4℃保存
临用加2mL试剂一超声完全溶
解,即0.2mg/mL尿酸溶液,再用蒸
馏水稀释2倍即0.1mg/mL备用。
三、所需仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、可调式移液器、离心机、蒸馏水。
四、尿酸含量检测:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定了解本批样品情况熟悉实验流程避免实
验样本和试剂浪费
1、样本制备:
① 液体样品:
澄清的液体可直接检测;若浑浊则离心后取上清液检测。
② 组织样本:
取约 0.1g 组织样本,加 1mL 的提取液研磨,粗提液全部转移到 EP 管中,12000rpm
常温离心 10min,上清液待测。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取。
③ 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。本试剂盒仅供科研使用
2
2、上机检测:
①酶标仪预热 30min,设置温度在 37℃,设定波长到 520nm
②做实验选取 2 个样本,找出适合本次检测样本的稀释倍数 D
③所有试剂解冻至室温,在 96 孔板中依次加入:
试剂名称(μL
测定管
空白管
(仅做一次)
标准管
(仅做一次)
样本
10
蒸馏水
10
标准品
10
试剂一
100
100
100
试剂二
80
80
80
混匀,37℃避光孵育 5min,于 520nm 处读取吸光值 A1
试剂三
10
10
10
混匀,37℃避光反应 10min520nm 处读取吸光值 A2(直到 A2
值不变),ΔA =A2-A1
【注】:1. 测定管的 A 值若超过 1,可把样本再进行稀释,稀释倍数 D 代入计算公式。
2. A 的差值在零附近徘徊,可增加样本加样量 V1(如增至 40μL,则试剂一相应减少,
保持总体积不变),则改变后的 V1 需代入公式重新计算。
五、结果计算:
1、按液体体积计算:
尿酸含量(mg/mL)=(C 标准×V )×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)÷V1×D
=0.1×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)×D
尿酸含量(μmol/L)=(C 标准×V )×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)÷V1×D×106÷Mr
=0.1×106÷Mr×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)×D
2、按样本鲜重计算:
尿酸含量(mg/g)=(C 标准×V )×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)÷(W×V1÷V)×D
=0.1×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白) ÷W×D
3、按细胞数量计算:
尿酸含量(μg/104 cell)=(C 标准×V ) ×103×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)÷(500×V1÷V)×D
=0.2×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)×D
C 标准---尿酸标品浓度,0.1mg/mL
D---稀释倍数,未稀释即为 1
V ---加入样本体积,0.01mL
V1---加入样本体积,0.01mL
V---提取液体积,1mL
W---取样质量,g
500---细胞数量,万;
Mr---尿酸分子量,168.1

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