您好,欢迎来到易推广 请登录 免费注册

上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

当前位置: 易推广 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生化试剂 > 其他 > 上海瓦兰生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂盒 > GABA转氨酶(GABA-T)试剂盒

GABA转氨酶(GABA-T)试剂盒

价格:¥880

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号:24T 原产地:中国大陆 发布时间:2023/11/9 14:27:48更新时间:2024/12/12 16:49:20

产品摘要:我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多,质量好,灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测(为您节省时间)具体价格请lai电咨询

产品完善度: 访问次数:150

企业档案

会员类型:会员

已获得易推广信誉   等级评定
41成长值

(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问

(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈

(91+  )优质信誉积累,可持续信赖

易推广会员:14

工商认证 【已认证】

最后认证时间:

注册号:**** 【已认证】

法人代表: 【已认证】

企业类型:经销商 【已认证】

注册资金:人民币**万 【已认证】

产品数:10849

参观次数:4954148

手机网站:http://m.yituig.com/c58091/

旗舰版地址:http://www.knbio.net

详细内容

 
本试剂盒仅供科研使用
γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)测定试剂盒说明书
(货号:WS3011F 分光法 24 样)
一、产品简介:
γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-TEC 2.6.1.96)GABA 支路中的关键酶,催化 GABA
的降解和转化。
本试剂盒利用γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)催化丙酮酸和 GABA 反应生成生成琥
珀酸半醛和丙氨酸,通过检测 GABA 的减少量进而得出 GABA-T 酶活力大小。
反应方程式:4-aminobutanoate + pyruvate = succinate semialdehyde + L-alanine
二、试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1
4℃保存
试剂一
粉体 mg×1
4℃保存 临用甩几下使粉剂落入底部,
再加 3mL 试剂三溶解备用。
试剂二
粉体 mg×1
4℃保存 临用甩几下使粉剂落入底部,
再加 5mL 试剂三溶解备用。
试剂三
液体 8mL×1
4℃保存
试剂四
液体 11mL×1
4℃保存
试剂五
液体 10mL×1
4℃保存
试剂六
A:液体 13mL×2
B:液体 2mL×1
4℃保存 临用取
0.9mL B 液进一瓶 A
液中,混匀后作为试剂六使用。
混匀后的试剂六半个月内用完。
标准品
粉体 mg×1
4℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅、离心机、可调式移液器、
研钵、冰和蒸馏水。
四、γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)活性测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样本情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、 样本制备:
取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,冰浴匀浆,12000rpm4℃离心 10min,取上清液待用。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取
2、 上机检测:
1 可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 645nm,蒸馏水调零。
② 所有试剂解冻至室温,在 EP 管依次加入:
试剂名称(μL
测定管
对照管
样本
80
80
试剂一
80
蒸馏水
80
试剂二
80
80
混匀,于 30℃孵育 30min
试剂四
160
160
立即混匀,室温 12000rpm,离心 5min,上清液待测本试剂盒仅供科研使用
2
③ 显色反应:于 EP 管依次加入:
上清液
100
100
试剂四
60
60
试剂五
200
200
试剂六
400
400
混匀,沸水浴(95-100℃10min,冰浴至室温,呈现蓝绿色颜
色,全部液体转移至 1mL 玻璃比色皿中,于 645nm 处读取各管
A 值,A=A 对照-A 测定(每个样本需做一个自身对照)
【注】若ΔA 值在零附近,可增加样本质量 W(如增至 0.2g),或延长 30℃孵育时间 T(如增
1h 或更长),或加大样本量 V1(如增至 1500μL,则试剂四相应减少),则改变后的 W
T V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算:
1、标准曲线:y = 0.8609x - 0.0032x 为标准品浓度(mg/mL)y 为吸光值ΔA
2、按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每毫克组织蛋白每小时消耗 1mg GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T 活力(mg/h/mg prot)=[(ΔA+0.0032)÷0.8609]×V2÷(V1×Cpr)÷T
=11.62×(ΔA+0.0032)÷Cpr
3、按样本鲜重计算:
单位定义:每克组织每小时消耗 1mg GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T 活力(mg/h/g 鲜重)=[(ΔA+0.0032 ÷0.8609]×V2÷(W×V1÷V)÷T
=11.62×(ΔA+0.0032)÷W
4、按细菌/细胞数量计算:
单位定义:每 104个细胞每小时消耗 1mg GABA 定义为一个酶活单位。
GABA-T 活力(mg/h/104 cell)=[(ΔA+0.0032)÷0.8609]×V2÷(500×V1÷V)÷T
=0.03×(ΔA+0.0032)
5、按照液体体积计算:
单位定义:每毫升液体每小时消耗 1mg GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T 活力(mg/h/mL)=[(ΔA+0.0032)÷0.8609]×V2÷V1÷T=11.62×(ΔA+0.0032)
V---提取液体积,1mL
V1---加入反应体系中样本体积,0.08mL
V2---反应体系总体积:0.4mL
T---反应时间,30min=0.5hW---样本质量,g
Cpr----样本蛋白质浓度,mg/mL,建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
附:标准曲线制作过程:
1 标准品母液(2mg/ml):标准品临用加 1mL 蒸馏水溶解。
2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1, 1.2 mg/ml。也可根据实
际样本来调整标准品浓度。
3 按照显色反应阶段的测定管加样体系操作,根据结果即可制作标准曲线。

快速导航

在线咨询

提交