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GABA转氨酶(GABA-T)试剂盒微板法
价格：￥1420
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/9 14:38:59更新时间：2024/9/6 9:47:55
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：163
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
γ-氨基丁酸转氨酶（GABA-T）测定试剂盒说明书
（货号：WS3011W 微板法 48 样）
一、产品简介：
γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T，EC 2.6.1.96)是 GABA 支路中的关键酶，催化 GABA
的降解和转化。
本试剂盒利用γ-氨基丁酸转氨酶（GABA-T）催化丙酮酸和 GABA 反应生成生成琥
珀酸半醛和丙氨酸，通过检测 GABA 的减少量进而得出 GABA-T 酶活力大小。
反应方程式：4-aminobutanoate + pyruvate = succinate semialdehyde + L-alanine
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉体 mg×1 支
4℃保存
临用甩几下使粉剂落入底部，
再加 3mL 试剂三溶解备用。
试剂二
粉体 mg×1 支
4℃保存
临用甩几下使粉剂落入底部，
再加 4.5mL 试剂三溶解备用。
试剂三
液体 8mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体 11mL×1 瓶
4℃保存
试剂五
液体 10mL×1 瓶
4℃保存
试剂六
A：液体 8mL×3 瓶
B：液体 2mL×1 支
4℃保存
临用取0.55mL的B液进一瓶A
液中，混匀后作为试剂六使用。
混匀后的试剂六半个月内用完。
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、水浴锅、离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
四、γ-氨基丁酸转氨酶（GABA-T）活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样本情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、 样本制备：
取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心 10min，取上清液待用。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
2、 上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 645nm。
② 所有试剂解冻至室温，在 EP 管依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
样本
40
40
试剂一
40
蒸馏水
40
试剂二
40
40
混匀，于 30℃孵育 30min
试剂四
80
80
立即混匀，室温 12000rpm，离心 5min，上清液待测本试剂盒仅供科研使用
2
③ 显色反应：于 EP 管中依次加入：
上清液
50
50
试剂四
30
30
试剂五
100
100
试剂六
200
200
混匀，沸水浴（95-100℃）10min，冰浴至室温，呈现蓝绿色颜
色，若浑浊需 12000rpm 离心 5min，取澄清的 200μL 至 96 孔板
中，于 645nm 处读取各管的 A 值，△A=A 对照-A 测定(每个样本
需做一个自身对照)。
【注】若ΔA 值在零附近，可增加样本质量 W（如增至 0.2g），或延长 30℃孵育时间 T（如增至
1h 或更长），或加大样本量 V1（如增至 80μL，则试剂四相应减少），则改变后的 W 和 T 和
V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、标准曲线：y = 0.508x - 0.0003，x 为标准品质量(mg/mL)，y 为吸光值ΔA。
2、按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每毫克组织蛋白每小时消耗 1mg 的 GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T (mg/h/mg prot)=[(ΔA+0.0003)÷0.508]×V2÷(V1×Cpr)÷T=19.7×(ΔA+0.0003)÷Cpr
3、按样本鲜重计算：
单位定义：每克组织每小时消耗 1mg 的 GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T (mg/h/g 鲜重)=[(ΔA+0.0003)÷0.508]×V2÷(W×V1÷V)÷T
=19.7×(ΔA+0.0003)÷W
4、按细菌/细胞数量计算：
单位定义：每 104个细胞每小时消耗 1mg 的 GABA 定义为一个酶活单位。
GABA-T (mg/h/104 cell)=[(ΔA+0.0003)÷0.508]×V2÷(500×V1÷V)÷T
=0.04×(ΔA+0.0003)
5、按照液体体积计算:
单位定义：每毫升液体每小时消耗 1mg 的 GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T(mg/h/mL)=[(ΔA+0.0003)÷0.508]×V2÷V1÷T=19.7×(ΔA+0.0003)
V－－-提取液体积，1mL；
V1－－-加入反应体系中样本体积，0.04mL；
V2－－-反应体系总体积：0.2mL；
T－－-反应时间，30min=0.5h； W－－-样本质量，g；
Cpr－－-样本蛋白质浓度，mg/mL，建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
附：标准曲线制作过程：
1 标准品母液（2mg/ml）：标准品临用加 1mL 蒸馏水溶解。
2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1, 1.2 mg/ml。也可根据实
际样本来调整标准品浓度。
3 按照显色反应阶段的测定管加样体系操作，根据结果即可制作标准曲线。
热门标签：GABA转氨酶(GABA-T)试剂盒
