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肌酸(Creatine)含量试剂盒(肌酸酶法)微板法
价格：￥520
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：96T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/9 15:04:13更新时间：2024/6/5 10:34:09
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：161
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
肌酸含量（酶法）检测试剂盒说明书
（货号:WS3021W 微板法 96 样）
一、产品简介：
肌酸是一种内源性化合物，其功能是通过肌酸激酶的磷酸化使机体维持高的ATP/ADP
比率。肌酸补充剂是一种运动性能增强剂，亦用于治疗肌肉和神经退行性等疾病。因此
肌酸的检测在研究和开发中具有广泛的应用。
本试剂盒利用肌酸酶特异作用于肌酸生成肌氨酸，肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生
成过氧化氢，过氧化氢与显色剂反应呈现（粉）红色，该有色物质在520nm有大吸收
峰，进而计算得到肌酸含量。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 11mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 8mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
粉体 mg×1 支
-20℃保存
临用甩几下使液体落入底部，
再加 1.1mL 的蒸馏水溶解备用。
试剂四
粉体 mg×1 支
-20℃保存
临用甩几下使液体落入底部，
再加 1.1mL 的蒸馏水溶解备用。
标准管
液体 1mL×1 支
4℃保存
临用用蒸馏水稀释2倍，
即0.5mg/mL肌酸溶液
三、所需仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调式移液器、离心机、蒸馏水。
四、肌酸含量检测：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、 样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织样本，加 1mL 的提取液研磨，粗提液全部转移到 EP 管中，12000rpm，
常温离心 10min，上清液待测。
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
③ 液体样品：澄清的液体可直接检测；若浑浊则离心后取上清液检测。本试剂盒仅供科研使用
2
2、上机检测：
①酶标仪预热 30min，设置温度在 37℃，设定波长到 520nm。
②做实验选取 2 个样本，找出适合本次检测样本的稀释倍数 D。
③所有试剂解冻至室温，在 96 孔板中依次加入：
试剂名称（μL） 测定管
空白管
（仅做一次）
标准管
（仅做一次）
样本
10
蒸馏水
10
标准品
10
试剂一
100
100
100
试剂二
70
70
70
试剂三
10
10
10
混匀，37℃避光孵育 10min，
试剂四
10
10
10
混匀，37℃避光反应 30min，520nm 处读取吸光值 A（直到 A 值不变），
△A=A 测定-A 空白。
【注】：1. 测定管的 A 值若超过 1，可用蒸馏水对样本进行稀释，稀释倍数 D 代入计算公式。
2. 若△A 的值小于 0.005，可增加样本加样体积 V1（如由 10μL 增至 50μL，则试剂一相应
减少），或增加样本取样质量 W；则改变后的 V1 和 W 需代入公式重新计算。
3. 若样本自身含有高的肌氨酸含量，需增设一个样本自身对照：
（即 10μL 样本+110μL 试剂一+70μL 试剂二+10μL 试剂三），△A=A 测定-A 对照。
五、结果计算：
1、按照质量计算：
肌酸含量(μmol/g)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×W)×D×103÷Mr
=3.81×△A÷(A 标准-A 空白)×D÷W
2、按细胞数量计算：
肌酸含量(nmol/104 cell)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×500)×D×106÷Mr
=7.63×△A÷(A 标准-A 空白)×D
3、按照体积计算：
肌酸含量(μmol/L)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷V1×D×106÷Mr
=3813×△A÷(A 标准-A 空白)×D
C 标准－－-标品浓度，0.5mg/mL；
Mr－－-标准品分子量，131.13；
V－－-提取液体积，1mL；
V1－－-加入样本体积，0.01mL；
500－－-细胞数量，百万；
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1。
