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土壤几丁质酶试剂盒微板法
价格：￥1250
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/13 13:37:13更新时间：2024/12/5 16:40:36
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：155
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
土壤几丁质酶试剂盒说明
（货号：WS5330W 微板法 48 样）
一、产品简介：
多种微生物、动物、植物等都可产生几丁质酶，土壤中几丁质酶主要水解几丁质多
聚体产生 N-乙酰氨基葡萄糖，该产物进一步与铁氰hua钾反应，于 420nm 处检测，进
而计算得到土壤几丁质酶活性大小。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 25mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉体 mg×1 瓶
4℃保存
临用甩几下使粉体落入底部，
再加 3mL 盐酸充分混匀溶解后，
再加 3mL 蒸馏水混匀备用。
试剂三
粉体 mg×1 支
-20℃保存
临用甩几下使粉体落入底部，
再加 1.2mL 蒸馏水溶解备用。
试剂四
液体 2mL×1 瓶
4℃保存
试剂五
液体 5mL×1 瓶
4℃保存
试剂六
粉体 g×1 瓶
4℃保存
临用甩几下使粉体落入底部，
再加 24mL 蒸馏水溶解备用。
标准品
粉剂×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、天平、水浴锅、低温离心机、盐酸、蒸馏水。
四、土壤几丁质酶活性测定：
1、样本制备：
取新鲜土样或 37℃烘箱风干，先粗研磨，过 40 目筛网备用。
2、上机检测：
①酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 420nm。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土样（g）
0.1g
0.1g
试剂一
200
300
试剂二
100
混匀，37℃（恒温培养箱）孵育 3h，4000rpm 离心 5min，取上清。
③ 在 EP 管中依次加入：
上清液
150
150
试剂三
10
10
试剂四
15
15
混匀，37℃孵育 0.5h。
试剂五
50
50
混匀，4000rpm 离心 5min，取上清液待测。
④在 EP 管中依次加入：
上清液
150
150本试剂盒仅供科研使用
2
试剂六
200
200
混匀，95-100℃煮沸 10min，若有沉淀，于 12000rpm 室温离心 5min，
取 200µL 上清液至 96 孔板中于 420nm 处读取各管吸光值 A，
ΔA＝A 对照-A 测定（每个样本做一个自身对照）。
【注】若ΔA 较小，可以加大样本量（如增至 0.2g），或延长 37℃的孵育时间（由 3h 增加
至 5h 或更长），则改变后的样本重量 W 和反应时间 T 需代入公式重新计算。
五、结果计算：
1、 标准曲线方程：y = 0.0417x + 0.0005，x 是标准品质量（μg），y 是ΔA。
2、按照样本重量计算:
酶活定义：每克土壤每小时分解几丁质产生 1μgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个单位。
土壤几丁质酶活性(μg/h/g 土壤)=[(ΔA-0.0005)÷0.0417×3]÷W÷T=24×(ΔA-0.0005)÷W
T－－-反应时间，3h；
W－－-样本质量，g；
3－－-体积系数；
标准品分子量－－-221.21；
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（1mg/mL）：标准品临用加 2mL 蒸馏水，即为 1mg/mL。
2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1mg/mL。也可根据
实际样本来调整标准品浓度。
3 依据第④步骤的加样体系：150μL 标准品+200μL 试剂六，混匀，95-100℃煮沸 10min，
取 200µL 至 96 孔板中于 420nm 处读取各管吸光值 A，标准品的质量作为横坐标，0
mg/mL 对应的 A 值减去各浓度标准品对应的 A 之差作为纵坐标，即可得出标准曲
线。
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