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脂肪酸合成酶（FAS）试剂盒微板法
价格：￥2410
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/13 14:57:57更新时间：2023/11/24 9:40:17
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：152
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
脂肪酸合成酶（Fatty acid synthetase，FAS）试剂盒说明书
（货号:WS3290W 微板法 48 样）
一、产品简介：
脂肪酸合成酶（FAS，EC 2.3.1.85）是脂肪酸合成关键酶，催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅
酶 A 而生成长链脂肪酸。FAS 普遍表达于各种组织细胞中，在哺乳动物肝、肾、脑、肺
和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。
FAS 催化乙酰 CoA、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成长链脂肪酸和 NADP+；NADPH 在
340nm 有吸收峰，通过测定 340nm 光吸收下降速率，进而计算 FAS 活性大小。
二、测试盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 50mL×1 瓶
4℃保存
用摇匀再用。
试剂一
粉剂 mg×1 支
-20℃保存
用甩几下或离心使粉剂落入底部，加
0.6mL 蒸馏水溶解备用。用不完的试剂
分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂二
粉剂 mg×2 支
-20℃保存
用甩几下或离心使粉剂落入底部，分
别加 0.3mL 蒸馏水溶解备用。用不完的
试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，
一周内用完。
试剂三
液体 7mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
粉剂 mg×1 支
4℃保存
用甩几下或离心使粉剂落入底部，加
0.6mL 蒸馏水溶解备用。用不完的试剂
分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰。
四、脂肪酸合成酶（FAS）活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织（水分充足的果实样本可取 0.2-0.3g），加入 1mL 提取液（用摇匀再用），
进行冰浴匀浆，13000rpm，4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取。
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取
液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；12000rpm
4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
2、上机检测：
1 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，所有试剂解冻至室温（25℃）。
2
在 96 孔板中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
样本
40
试剂一
10本试剂盒仅供科研使用
2
试剂二
10
试剂三
130
混匀，室温（25℃）孵育反应 10min。
试剂四
10
混匀，室温（25℃）于 340nm 处立即读取 A1，15min
后读取 A2。△A=A1-A2。
【注】1. 若△A 值低于 0.008，可增加样本加样体积 V1（如增至 60μL，则试剂三相应减少，但需控
制 A1 值低于 1.8）或延长孵育时间（如延长至 30min）再读取 A2 值。
2. 若 A1 值超过 1.8，需减少样本加样体积 V1（如减至 20μL，则试剂三相应增加），且△A 应
小于 0.3。
3. 若下降趋势不稳定，可以每隔 20S 读取一次吸光值，选取一段线性下降的时间段来参与计算，
相对应的 A 值也代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每毫克组织蛋白每分钟氧化 1nmol NADPH 定义为一个酶活单位。
FAS(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(V1×Cpr)÷T=107.2×ΔA÷Cpr
2、按样本鲜重计算：
单位定义：每克组织在每分钟内氧化 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
FAS(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(W×V1÷V)÷T=107.2×ΔA÷W
3、按细菌/细胞数量计算：
单位定义：每 104个细胞在每分钟内氧化 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
FAS(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(500×V1÷V)÷T=0.214×ΔA
V－－-加入提取液体积，1 mL；
V1－－-加入样本体积，0.04mL；
V2－－-反应体系总体积，2×10-4 L；
d－－-96 孔板光径，0.5cm；
ε－－-NADPH 摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；
W－－-样本质量，g；
T－－-反应时间，15min；
500－－-细胞数量，百万；
Cpr－－-蛋白浓度（mg/mL），建议使用本公司的 BCA 蛋白含量测定试剂盒。
热门标签：脂肪酸合成酶（FAS）试剂盒
