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土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa）活性试剂盒微板法
价格：￥1850
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/14 14:41:21更新时间：2024/10/21 8:57:54
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：161
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa）活性测定试剂盒说明书
(货号:WS5430W 微板法 48 样)
一、产品简介：
土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa，EC 3.2.1.55）是一种能够水解非还原呋喃阿拉
伯糖残基的糖苷酶类。
本试剂盒提供一种简单，灵敏，快速的测定方法，S-α-Afa分解对-硝基苯阿拉伯呋喃
糖苷生成对-硝基苯酚（PNP），后者在405nm有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率即
可得出α-Afa酶活性大小。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 40mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂 mg×1 瓶
4℃保存
临用甩几下使粉剂落入底部，再
加 15.5mL 试剂一，充分溶解备用。
试剂三
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉剂 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、蒸馏水。
四、土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa）活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
取新鲜土样或者 37 度烘箱风干（需先粗研磨），过 40 目筛网，备用。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30 min，调节波长到 405 nm。
② 在离心管中依次加入下列试剂：
【注】：1. 若 A 测定超过 1.8，可对后一步的待检测上清液(测定管和对照管)同时进行稀释（用水稀释即
可），稀释倍数 D 代入计算公式；
2.若ΔA 过小，可以增加土样量或延长保温时间（如：2h 或更长），重新调整的样本量 W 和反应
时间 T 需代入计算公式重新计算。
3. 若同时检测同一背景下的土壤样本，此批土壤样本可做一个样本自身对照，节省时间；若是不
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土壤（g）
0.1g
0.1g
试剂一
300
试剂二
300
迅速混匀，37℃保温 1h（间隔 15min 振荡混匀一次）
试剂三
200
200
混匀，12000rpm，离心 5min，立即取上清液 200μL
于 96 孔板中，立即于 405nm 下读取吸光值 A，△A= A
测定- A 对照（每个样本需做一个自身对照）。本试剂盒仅供科研使用
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同背景下的土壤样本（如黑土，红土，黄土等），则每个样本需做一个自身对照，即按照说
明书加样表操作即可，
五、结果计算：
1、标准曲线：y = 0.1292x - 0.0128；x 是标准品 PNP 质量（μg）， y 是△A。
2、活性定义：在 37℃，每小时每克土壤产生 1μg 对-硝基苯酚（PNP）定义为 1 个酶活单位。
S-α-Afa(μg/h/g 土样)=[(△A+0.0128)÷0.1292]÷W÷T×D=7.74×(△A+0.0128)÷W×D
W－－-土壤样品质量，g；
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1；
T－－-催化反应时间，1 h；
PNP 相对分子质量－－-139.11。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（1mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1ml 蒸馏水溶解，若有结晶
析出，需 37℃水浴至完全溶解。
2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1 mg/mL。也可根据实际
样本来调整标准品浓度。
3 在 EP 管中直接加入：10μL 标准品+290μL 试剂一+200μL 试剂三，混匀，立即取上
清液 200μL 于 96 孔板中，立即于 405nm 下读取吸光值 A。
4 根据结果制作标准曲线。
