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土壤半纤维素酶/土壤木聚糖酶微板法
价格：￥1020
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/14 15:16:02更新时间：2024/10/11 9:25:40
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：158
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
土壤半纤维素酶/土壤木聚糖酶试剂盒说明书
（货号：WS6230W 微板法 48 样）
一、产品简介：
半纤维素酶主要检测木聚糖酶活力，是将木聚糖降解成低聚糖和木糖的一组酶的总
称，广泛应用于酿造和饲料工业中。
土壤半纤维素酶在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，进一步在沸水浴
条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的
深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，即可
计算该酶活力大小。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 15mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉剂×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调式移液器、天平、常温离心机、空气浴（恒温震荡仪）、水浴锅。
四、土壤半纤维素酶活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
取新鲜土样或干土（风干或者 37 度烘箱风干），先粗研磨，过 40 目筛网备用。
【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min，调节波长至 540nm。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土样（g）
0.3
0.3
试剂一
600
900
试剂二
300
充分混匀，40℃培养 6 小时（振荡培养或间隔一段时间手动振荡
混匀几下），12000rpm，25℃离心 10min，上清液待用
③ 显色反应，在 EP 管中依次加入：
上清液
40
40
试剂三
200
200
混匀，沸水浴（95-100℃，可用封口膜缠紧，防止水分流失）5min
后，冷却至室温。
蒸馏水
800
800
混匀，若浑浊则 8000rpm 室温离心 5min，取 200μL 液体至 96
孔板中，于 540nm 处读取吸光值 A，△A=A 测定管-A 空白管。
【注】：1.若ΔA 较小，可延长 40℃的孵育时间 T（如 24 小时或更长），或增加土样质量 W，
或增加③歩显色反应步骤中的上清液 V1（如由 40μL 增至 240μL 或更多，则蒸馏
水相应减少）。则改变后的 T 和 W 和 V1 需代入计算公式重新计算。本试剂盒仅供科研使用
2
2.若测定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1，③歩显色反应步骤中的上清液可用蒸馏水稀释，
则稀释倍数 D 代入公式计算。
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y=7.5568x+0.0007，x 是标准品质量（mg），y 是△A。
2、酶活定义：PH4.8 条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生 1mg 还原糖所需的酶量为
一个酶活单位。
土壤半纤维素酶活力(mg/d/g 土样)=[(△A-0.0007)÷7.5568]×(V2÷V1)÷W÷T×D
=12×(△A-0.0007)÷W×D
V1－－-显色反应中上清液体积，40μL=0.04mL；
V2－－-反应总体积，900μL=0.9mL；
T－－-反应时间，1/4d；
W－－-土壤样本质量，g；
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（5mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1mL 蒸馏水（母液需在两天
内用且-20℃保存）。
2 把母液稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 1, 2, 3, 4, 5. mg/mL。也可根据实际样本来
调整标准品浓度。
3 在显色反应阶段，按照测定管加样表操作，依据结果即可制作标准曲线。
热门标签：土壤半纤维素酶/土壤木聚糖酶
