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蛋白含量(SP)试剂盒(考马斯亮蓝法)微板法
价格：￥140
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：96T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/15 16:18:38更新时间：2024/3/18 9:27:59
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：157
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金标层析卡
细胞生物学检测
详细内容
本试剂盒仅供科研使用
考马斯亮蓝法测蛋白含量试剂盒说明书
（货号：WS7140W 微板法 96 样）
一、产品简介：
在酸性溶液中，考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合形成蓝色复合物；经光谱扫描，该蓝
色复合物在 600nm 处有大吸收峰，在一定的蛋白浓度范围（1-1000μg/mL）内，其颜
色的深浅与蛋白质的含量成正比。
二、测试盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
标准品
液体 1mL×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、离心机、可调式移液器、研钵和蒸馏水。
四、蛋白含量检测：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
1
组织样本：
称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液（提取液可选用酶提取缓冲液、蒸馏水、生理盐
水）冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心 10min，取上清，即待测液。
【注】：依据研究经验，一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定，如 10 倍。实
验可以先选 2 个样本测定，摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
2
细菌或细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取
液；超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30
次），12000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：依据研究经验，一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定，如 10 倍。实
验可以先选 2 个样本测定，摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
3
液体样本：澄清无色液体样品可以直接测定。若浑浊，离心后取上清检测。
【注】：依据研究经验，一般需将样本稀释到适当倍数再进行测定，如 10 倍。实验
可以先选 2 个样本测定，摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30 min 以上，设定波长为 600nm。
② 在 96 孔板中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
空白管(只做一次)
待测液
40
蒸馏水
40
试剂一
200
200
混匀，,置于室温（25℃）静置 10min，600nm 处测定吸光值 A
（5~15min 完成比色），△A= A 测定管-A 空白管。
【注】：1.确保蛋白浓度在 0~100µg/ml 范围内，否则需要做相应稀释，即好使 A 测定的值低于 1.2；稀
释倍数 D 带入公式计算。
2.去污剂、Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和 0.1mol/L 的 NaOH 溶液对该实验会有影响。本试剂盒仅供科研使用
2
五、结果计算：
1、标准曲线：y = 3.8457x + 0.0136；x 是标准品浓度（mg/mL），y 是△A。
2、蛋白含量 (mg/g 鲜重)=[(△A-0.0136)÷3.8457×V1]÷(W×V1÷V)×D
=0.26×(△A-0.0136)×D÷W
3、蛋白含量(mg/mL)= [(△A-0.0136)÷3.8457×V1]÷V1×D=0.26×(△A-0.0136)×D
V－－-提取液体积：1mL；
V1－－-加入粗提液体积：0.04mL；
W－－-样本质量：g；
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1。
附：标准曲线制作过程：
1 标准品母液（0.5mg/mL）。
2 把母液用蒸馏水稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1. mg/mL。
也可根据实际样本来调整标准品浓度。
3 依据测定管加样表操作，根据结果即可制作标准曲线。
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