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土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒
价格：￥1360
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2023/11/17 11:18:09更新时间：2024/10/31 8:51:52
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测（为您节省时间）具体价格请lai电咨询
产品完善度： 访问次数：161
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
土壤亮氨酸氨基肽酶（Solid-Leucine Aminopeptidase,S-LAP）
试剂盒说明书
（货号：WS9230F48 分光法 48 样）
一、产品简介：
土壤亮氨酸氨基肽酶（LAP，EC 3.4.11.1）是一类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶，
由土壤微生物分泌。该酶活性变化与机体某些病理状态密切相关。
土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺，该物质在
405nm 有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算 S-LAP 活性。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存条件
备注
试剂一
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂 mg×2 支
-20℃保存
临用甩几下，使试剂落入底部，
每支加 1.5mL 乙醇混匀溶解。
试剂三
液体 35mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉剂 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、台式离心机、恒温振荡培养箱/水浴
锅、可调式移液器、天平。
四、土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实
验样本和试剂浪费！
1、样本处理：
取新鲜土样或干土（风干或者 37 度烘箱风干），先粗研磨，过 40 目筛网备用。
【注】土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、上机检测：
① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 405nm，蒸馏水调零。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
空白管（仅做一次）
土样（g）
0.05
0.05
试剂一
450
500
450
试剂二
50
50
充分混匀，37℃培养 1 小时（振荡培养或间隔 20min 手动振荡混匀
几下）
试剂三
300
300
300
混匀，8000rpm 离心 5min（若上清液不澄清可加大离心力），取全部
上清液至 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中，405nm 下读取吸光值 A，
△A=A 测定- A 对照-A 空白（每个样本做一个自身对照）。
【注】：1.若ΔA 较小，可延长 37℃的孵育时间 T（如增至 4 小时或更长），或增加土样质
量 W（如增至 0.2g）。则改变后的 T 和 W 需代入计算公式重新计算。
2.若测定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1.5，可缩短 37℃的孵育时间 T（如减至 0.5 小时或更短）。
则改变后 T 需代入计算公式重新计算。或对后一步的待检测上清液（包括测定管、对照管本试剂盒仅供科研使用
2
和空白管）同时用蒸馏水进行稀释，稀释倍数 D 代入计算公式。
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 0.0116x + 0.0036；x 为标准品摩尔质量（nmol），y 为△A。
2、单位定义：每小时每克土样生成 1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP(nmol/h/g 土样)=(ΔA-0.0036) ÷0.0116÷W÷T×D =86.2×(ΔA-0.0036)÷W×D
T－－-反应时间，1h；
W－－-土壤样本实际取样量，g。
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（10μmol/mL）：临用甩几下或离心，使粉体落入底部，加入 0.5mL
乙醇，涡旋震荡溶解后再加入 0.5mL 的蒸馏水混匀，得到 10μmol/mL 备用。
2 把母液用蒸馏水稀释成以下浓度：0,0.4,0.8,1.2,1.6, 2μmol/mL。也可根据实际样本来
调整标准品浓度。
3 在 EP 管依次加入：50μL 标准品+450μL 试剂一+300μL 试剂三，混匀，取全部液体
至 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中，于 405nm 下读取吸光值，根据结果制作标准
曲线。
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