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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

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查尔酮异构酶(CHI)试剂盒微板法

价格:¥1450

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号:96T 原产地:中国大陆 发布时间:2023/11/27 10:43:03更新时间:2024/11/12 9:28:18

产品摘要:我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多,质量好,灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测(为您节省时间)具体价格请lai电咨询

产品完善度: 访问次数:158

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详细内容

 
本试剂盒仅供科研使用
查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)试剂盒说明书
WS7001W 微板法 96 样)
一、产品简介:
查尔酮异构酶(CHI, EC 5.5.1.6)第yi个被认识的黄酮类化合物合成相关酶,也是黄
酮代谢途径中的关键酶。广泛存在于多种植物中,在植物的抗菌机制、抗胁迫、细
胞的发育和分化、色素的积累和外源基因的表达等方面起着重要的作用。
查尔酮异构酶(CHI)可使查尔酮形成二氢黄酮,通过检测查尔酮的初始降解速率进而
得出查尔酮异构酶的酶活性大小。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1
4℃保存
试剂一
液体 15mL×1
4℃保存
试剂二
粉体×2
4℃保存
临用离心或甩几下使试剂落入
底部,每支再分别加 0.7mL 乙醇
充分溶解,4℃保存。
三、所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
四、查尔酮异构酶(CHI)活性测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备:
称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆。12000rpm 4℃离心 15min,取上
清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例提取
2、上机检测:
① 酶标仪预热 30min 以上,温度设定 30℃,调节波长至 380nm
② 试剂放在 30℃水浴 5min
③ 按照下表在 96 孔板中依次加入试剂:
试剂名称(μL
测定管
样本
40
试剂一
150
试剂二
10
混匀,30℃条件下,立即于 380nm
处读取吸光值 A110min 后读取 A2
A=A1-A2
【注】:若ΔA 在零附近徘徊,可延长反应时间 T(如:30min 或更长),
或加大样本量 V1(如增至 80μL,则试剂一相应减少),重新
调整后的反应时间 T V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算:
1、按样本蛋白浓度计算:
酶活单位定义:每毫克组织蛋白每分钟吸光值变化 0.01 为一个酶活单位(U)。本试剂盒仅供科研使用
2
CHIU/min/mg prot)=(ΔA÷0.01)÷(V1×Cpr) ÷T=250×ΔA÷Cpr
2、按样本鲜重计算:
酶活单位定义:每克样本每分钟吸光值变化 0.01 为一个酶活单位(U)。
CHIU/min/g 鲜重)=(ΔA÷0.01)÷(W×V1÷V) ÷T=250×ΔA÷W
V---加入提取液体积,1 mL
V1---加入样本体积,0.04 mL
T---反应时间,10 min
W---样本质量,g
Cpr---样本蛋白质浓度,mg/mL,建议使用本公司的 BCA 蛋白含量测定试剂盒;

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