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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

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亚铁含量检测试剂盒(亚铁嗪比色法)微板法

价格:¥380

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号:96T 原产地:中国大陆 发布时间:2023/11/29 10:32:11更新时间:2024/11/19 10:35:48

产品摘要:我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多,质量好,灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。可以代检测(为您节省时间)具体价格请lai电咨询

产品完善度: 访问次数:157

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详细内容

 
本试剂盒仅供科研使用
亚铁含量(亚铁嗪比色法)检测试剂盒说明书
(货号:WS7121W 微板法 96 样)
一、产品简介:
亚铁即二价铁可与亚铁嗪生成紫红色化合物,该有色物质在 562nm 处有特征吸收峰,
进而计算得出亚铁含量。适用于检测组织、血清等样品中的亚铁含量。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1
4℃保存
试剂一
液体 26mL×1
4℃保存
试剂二
粉体×2
4℃保存
用甩几下或离心使粉体落入底部,每
支再加入 1.2mL 的蒸馏水溶解备用。
试剂三
液体 2mL×1
4℃保存
标准品
液体 1mL×1
4℃保存
临用用试剂三稀释50 (即取10μL
标准品至 EP 管中,再加 490μL 的试剂
),制备成 2μg/mL 的亚铁标准品。
三、所需仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、可调式移液器、离心机、蒸馏水。
四、亚铁含量检测:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实
验样本和试剂浪费!
1、 样本制备:
① 组织样本:
取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆。4℃×12000rpm 离心 5min,取上
清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取。
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液(mL)500~10001 的比例进行提取。
③ 液体样本:澄清的液体可直接检测;若浑浊则离心后取上清液检测。
2、上机检测:
①酶标仪预热 30min,设定波长到 562nm
② 所有试剂解冻至室温,在 EP 管中依次加入:本试剂盒仅供科研使用
2
【注】:若 A 测定管大于 0.8,可用蒸馏水对样本上清液进行稀释,稀释倍数 D 代入计算公式。
五、结果计算:
1、按照组织质量计算:
亚铁含量(μg/g)=(C 标准×V1)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×W)×D
=2×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ÷W×D
亚铁含量(nmol/g)=(C 标准×V1)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×W) ×103÷Mr×D
=35.81×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ÷W×D
2、按细胞数量计算:
亚铁含量(μg/104 cell)=(C 标准×V1)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×细胞数量) ×D
=2×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ÷细胞数量
亚铁含量(nmol/104 cell)=(C 标准×V1)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×细胞数量)
×103÷Mr×D
=35.81×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ÷细胞数量×D
3、按照液体体积计算:
亚铁含量(μg/mL)=(C 标准×V1)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
=2×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
亚铁含量(μmol/L)=(C 标准×V1)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×103÷Mr×D
=35.81×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
C 标准---亚铁标品浓度,2μg/mL
V1---加入样本体积,0.06mL
V---提取液体积,1mL
W---样本取样质量,g
D---稀释倍数,未稀释即为 1
Mr---亚铁分子量,55.847
试剂名称(μL) 测定管
标准管
(仅做一次)
空白管
(仅做一次)
样本
120
标准品
120
蒸馏水
120
试剂一
260
260
260
试剂二
20
20
20
充分混匀,置室温 15min 后,若浑浊则需 3000rpm 离心
5min 后,取 200μL 上清液至 96 孔板中,于波长 562nm
读取各管吸光度 A

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