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土壤过氧化氢酶(S-CAT)试剂盒微板法
价格：￥1500
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：96T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/1 14:11:30更新时间：2024/9/30 14:43:15
产品摘要：土壤过氧化氢酶主要分解土壤中的过氧化氢，降低土壤中过度累积的过氧化氢对植物根系的危害。本试剂盒提供一种简单，灵敏，快速的测定方法，即 CAT 催化过氧化氢产生水与氧气，剩余的过氧化氢与一种高灵敏显色探针反应生成有色物质，其在 510nm 左右有大吸收峰。通过过氧化氢的减少量来计算土壤中 CAT 酶的活力。
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金标渗滤卡
金标层析卡
细胞生物学检测
详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）试剂盒说明书
(货号：WS3030W 微板法 96 样)
一、产品简介：
土壤过氧化氢酶主要分解土壤中的过氧化氢，降低土壤中过度累积的过氧化氢对植物根
系的危害。本试剂盒提供一种简单，灵敏，快速的测定方法，即 CAT 催化过氧化氢产生水
与氧气，剩余的过氧化氢与一种高灵敏显色探针反应生成有色物质，其在 510nm 左右有
大吸收峰。通过过氧化氢的减少量来计算土壤中 CAT 酶的活力。
本试剂盒突出特点是从紫外波长（240nm：过氧化氢的检测波长）转换到可见波长
（510nm）检测，无需使用石英比色皿或 UV 板。而且由于过氧化氢其不稳定，直接检
测造成读值不稳定，且蛋白质等组分在此紫外波长下也有光吸收，影响结果精确性。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格试剂名称 保存要求
备注
试剂一
液体×1 支
4℃保存
用甩几下或者离心使试剂落入底
部，分别取出 40μL 至六个新的 EP 管
中，再加 2mL 蒸馏水充分溶解备用。
试剂二
液体 22mL×1 瓶
室温
试剂三
液体 35mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体 7mL×1 瓶
4℃保存
标准品
液体 1.5mL×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、蒸馏水。
四、土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干，先粗研磨，过 40 目筛网备用。
【注】：土壤风干，可减少土壤中水分对于实验的干扰；；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 510nm。
② 试剂一事先按照试剂配制要求配制好，再进行以下操作。
[建议]：若一次性样本较多，离心数量有限，可分批操作，待一批样本加完试剂二开始离心时，再
进行下一批操作（土壤样本可一次性称完，分批按照加样表操作）。
③ 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（µL）
测定管
无基质管
无土管
（仅做一次）
土样（g）
0.1
0.1
蒸馏水
800
800
800
室温（25℃）震荡（如：摇床）培养 30min，
试剂一
100
100
蒸馏水
100本试剂盒仅供科研使用
2
④ 显（粉）色反应：在 96 孔板中依次加入：
【注】：1. 无土管的颜色深，若测定管颜色很浅接近无色，说明样本里面过氧化氢酶含量很高，则震荡
10min 的时间缩短（如 5min）或减少土壤取样质量 W。则改变后的 T 和 W 重新代入公式计算。
2. 若一次性检测样本较多，在显色反应阶段可酌情分批操作和读值，为保证数据的精确性，显色
反应阶段好半个小时内完成。
五、结果计算：
1、标准曲线：y = 0.1027x - 0.0318；x 为标准品摩尔质量（µmol），y 为△A。
2、单位定义：每小时每克土样催化 1µmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
S-CAT(µmol/h/g 土样)=[(△A+0.0318)÷0.1027]÷W÷T=58.4×(△A+0.0318)÷W
T－－-反应时间，10min=1/6h；
W－－-土壤样本实际取样量。
附：标准曲线制作过程：
1 把标准品（100µmol/mL）稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 20, 40, 60, 80, 100.
µmol/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
2 按照无土管加样顺序（100µL 试剂一换成 100µL 标准品，其他不变）依次加入试剂
测定，标准品的摩尔质量作为横坐标，吸光值作为纵坐标，即得标准曲线。
混匀，室温（25℃）10min（务必每隔 2min 摇晃一次）。
试剂二
100
100
100
12000rpm，4℃或室温离心 10min，上清液务必全部转移至新的 EP 管
中，待测。
上清液
5
5
5
试剂三
165
165
165
试剂四
30
30
30
室温（25℃）静置 5min，务必立即在 510nm 下读取吸光值 A，
△A=A 无土管-（A 测定管-A 无基质管）。
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