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土壤纤维素酶(S-CL)/内切-β-1,4葡聚糖酶试剂盒微板法
价格：￥1820
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：96T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/1 16:53:40更新时间：2024/9/25 9:21:33
产品摘要：纤维素是植物残体进入土壤的碳水化合物的重要组分。在土壤纤维素酶作用下，可以催化纤维素水解生成纤维二糖、葡萄糖等还原糖
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤纤维素酶（Solid-cellulase，S-CL）活性测定试剂盒说明书
(货号:WS8030W 微板法 96 样)
一、产品简介：
纤维素是植物残体进入土壤的碳水化合物的重要组分。在土壤纤维素酶作用下，可
以催化纤维素水解生成纤维二糖、葡萄糖等还原糖，所以，纤维素酶是碳素循环中的一个
重要酶。本试剂盒采用3,5-二硝基水杨酸与终产物还原糖反应生成棕红色物质，在540nm
处有特征吸收峰，进而得到土壤纤维素酶活性。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
粉体 mg×2 瓶
4℃保存
临用每瓶加入 55mL 试剂二，
可 80℃水浴，搅拌至溶解，待用。
试剂二
液体 110mL×2 瓶
4℃保存
试剂三
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉剂 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、水浴锅或恒温振荡培养箱、可调式移液器、蒸馏水。
四、土壤纤维素酶（S-CL）活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
取新鲜土样或干土（风干或者 37 度烘箱风干），先粗研磨，过 40 目筛网备用。
【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、上机检测：
① 培养：在 EP 管依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土样（g）
0.3-0.5
0.3-0.5
试剂一
1000
试剂二
1000
充分混匀，40℃培养 24 小时（振荡培养或间隔一段时间手动振
荡混匀几下），12000rpm，25℃离心 10min，上清液待用
② 酶标仪预热 30min 以上，调节波长为 540nm。
③ 显色反应：在 EP 管中依次加入：
上清液
200
200
试剂三
100
100
混匀，95℃水浴 5min，待冷却后，取 200μL 于 96 孔板中，
在 540nm 处读取吸光值 A，△A=A 测定管-A 对照管。
【注】：1.若ΔA 较小，可延长 40℃的孵育时间 T（如 48 小时或更长），或增加土样质
量 W。则改变后的 V1 或土壤重量 W 需代入计算公式重新计算。
2.若测定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1，③歩显色反应步骤中的上清液可用蒸馏
水稀释，则稀释倍数 D 代入公式计算。本试剂盒仅供科研使用
2
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 15.161x - 0.0701；x 为标准品质量（mg），y 为△A。
2、单位定义：每天每克土样中产生 1μg 还原糖定义为一个酶活力单位。
土壤纤维素酶(S-CL)活力(μg/d/g 土样)=[(ΔA+0.0701)÷15.161×103×(V÷V1)]÷W÷T
=329.8×(ΔA+0.0701)÷W
V－－-反应总体积，1000μL；
V1－－-显色反应中上清液体积，200μL；
T－－-反应时间，24h=1d；
W－－-土壤样本实际取样量，g。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（1mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1mL 蒸馏水（母液需在两天
内用且-20℃保存）。
2 把母液稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5. mg/mL。也可根据实
际样本来调整标准品浓度。
3 在显色反应阶段，按照测定管加样表操作，依据结果即可制作标准曲线。
