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土壤硝酸还原酶(S-NR)试剂盒微板法
价格：￥1050
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/1 17:03:15更新时间：2024/12/26 14:28:07
产品摘要：土壤硝酸还原酶可以把土壤中的硝酸盐转变为亚硝酸盐，然后再通过亚硝酸还原酶的作用转变成氮循环的重要原料-铵，从而调节氮代谢，并影响到光合碳代谢，进而影响植物生长。
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤硝酸还原酶（Solid-Nitrate Reductase，S-NR）试剂盒说明书
(货号：WS9030W 微板法 48 样)
一、产品简介：
土壤硝酸还原酶可以把土壤中的硝酸盐转变为亚硝酸盐，然后再通过亚硝酸还原酶的作用
转变成氮循环的重要原料-铵，从而调节氮代谢，并影响到光合碳代谢，进而影响植物生长。
本试剂盒提供一种快速、精确的测定方法，土壤硝酸还原酶催化硝酸盐还原为亚硝酸盐；
同时抑制亚硝酸还原酶对产生的亚硝酸盐的降解，亚硝酸盐与对应的显色剂反应生成（粉）
红色偶氮化合物；该有色物质在 540nm 有大吸收峰，进而得出土壤硝酸还原酶的活性。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格试剂名称
保存要求
备注
试剂一
液体 25mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 6mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体 7mL×1 瓶
4℃保存
试剂五
A 液 6mL×1 瓶
4℃保存
临用，可依据待检测样本数量，
把A液和B液等比例混合成无色的
反应 mix（注意观察，若变粉色，
则不能使用）。 两天之内用完。
B 液 6mL×1 瓶
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、蒸馏水。
四、土壤硝酸还原酶（S-NR）的测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干，先粗研磨，过 40 目筛网，备用。
【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、测定步骤
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 540nm。
② 在 1mLEP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土样（g）
0.25
0.25
试剂一
200
200
试剂二
50
50
蒸馏水
250
250
混匀，且务必用封口膜封
口。25℃培养 24h
混匀，且务必用封口膜封口。-20℃培
养 24h（可放在-20℃冰箱）
试剂三
500
500
混匀，12000rpm，4℃离心 10min，上清液待用本试剂盒仅供科研使用
2
③ 显色反应，在 96 孔板中依次加入：
上清液
40
40
试剂四
60
60
反应 mix
100
100
混匀，25℃反应 5min（准确时间），立即于 540nm 处读取 A 值，
△A=A 测定-A 对照（每个样本做一个自身对照管）。
【注】：若△A 值低于 0.01，可增加③ 步中上清液的体积（如由 40μL 增至 100μL，则试剂四减至 0μL，
保持总体积仍为 200μL）。
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y =3.9669x - 0.0037；x 为标准品浓度（μmoL/mL），y 为吸光值△A。
2、单位定义：每天每克土样中产生 1μmoL 的 NO2 ˉ的量为一个酶活力单位。
S-NR(μmoL/d/g 土样)=[(△A+0.0037)÷3.9669×V1]÷W÷T
=0.252×(△A+0.0037)÷W
3、单位定义：每天每克土样中产生 1μg 的 NO2 ˉ的量为一个酶活力单位。
S-NR(μg/d/g 土样)=[(△A+0.0037)÷3.9669×V1]÷W÷T×46
=11.6×(△A+0.0037)÷W
V1－－-反应体系总体积，1mL；
T－－-反应时间，24h=1d； W－－-样本实际质量，g；
标准品的分子量－－-69；
NO2 -的分子量－－-46。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（100μmol/mL）：把标准品完全溶解于 1mL 蒸馏水中（母液需在两
天内用且-20℃保存）。
2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度标准品：0, 0.04, 0.08, 0.12, 0.16, 0.2. μmol/mL。
也可根据实际样本来调整标准品浓度。
3 依据显色反应阶段的测定管的加样顺序操作，根据结果即可制作标准曲线。
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