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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

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土壤过氧化物酶(S-POD)试剂盒

价格:¥540

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号:48T 原产地:中国大陆 发布时间:2024/7/2 10:08:21更新时间:2024/9/29 8:35:25

产品摘要:土壤过氧化物酶(S-POD)主要来源于土壤微生物,能够氧化土壤有机物质产生过氧化物,在腐殖质的形成过程中具有重要作用。

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详细内容

 
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤过氧化物酶(Solid- PeroxidaseS-POD)试剂盒说明书
(货号:WS7130FF 分光法 48 样)
一、产品简介:
土壤过氧化物酶(S-POD)主要来源于土壤微生物,能够氧化土壤有机物质产生过氧
化物,在腐殖质的形成过程中具有重要作用。
土壤过氧化物酶(S-POD)在过氧化氢存在下催化底物左旋多巴产生红色的醌类物质,
依据文献选择该有色产物在 475nm 做为特征光吸收波长,通过测定进而计算得出土壤过
氧化物酶活性大小。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 110mL×1
4℃保存
试剂二
粉体 mg×2
4℃保存
临用甩几下使粉剂落入底部,每瓶
加入 25mL 试剂一,超声溶解,溶解
后的试剂三天内用完。
试剂三
液体μL×1
4℃保存
临用甩几下使液体落入底部,取出
60μL 至新 EP 管中并再加 1.5mL 的蒸
馏水,混匀备用,三天内用完。
三、所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、水浴锅/恒温振荡培养
箱、可调式移液器。
四、土壤过氧化物酶(S-POD的测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备:
取新鲜土样或风干土壤,先粗研磨,过 40 目筛网,待测备用。
2、上机检测:
① 可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 475nm,蒸馏水调零。
② 在 EP 管中依次加入:
试剂名称(μL
测定管
对照管
土样(g
0.1
0.1
试剂一
160
960
试剂二
800
试剂三
40
40
振荡混匀,25℃水浴(间隔 10min 振荡混匀几下)或者恒温振荡培
养箱振荡孵育 1 h
孵育结束后立即于 4℃(需低温)12000rpm 离心 5min,取 700μL
上清液至 1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)中,于 475nm 处读取吸光
AA=A 测定管-A 对照管(每个样本需做一个自身对照)。
【注】:1. A 测定大于 1.8,可用蒸馏水对离心后待检测的上清液进行稀释,则稀释倍数 D 需代入公
式重新计算。本试剂盒仅供科研使用
2
2. A 值小于 0.01,可延长 25的孵育时间 T(如由 1h 可增加至 4h),则改变后的 T 需代入
公式重新计算。
五、结果计算:
1、单位定义:每小时每克土壤中产生 1nmol 红色产物定义为一个酶活力单位。
S-POD 活力(nmol/h/g 土样)=[ΔA÷(ε×d)×V1×109]÷W÷T×D=270.3×A÷W×D
ε---红色产物摩尔吸光系数,3.7×103 L/mol/cm
T---反应时间,1h
V1----反应总体积,1000μL=1mL=1×10-3 L
d---光径,1cm
D---稀释倍数,未稀释即为 1
W---土壤样本实际取样量,g

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