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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

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土壤荧光素二乙酸酯(FDA)水解酶试剂盒

价格:¥580

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号:48T 原产地:中国大陆 发布时间:2024/7/2 14:36:11更新时间:2024/7/2 14:36:11

产品摘要:土壤荧光素二乙酸酯(FDA)水解酶与土壤总碳、全氮、全磷等土壤养分指标间关系密切,与微生物活性间的相关性比其他酶活性更显着,同时也能够很好地反映系统中有机质的转化和土壤中微生物的活性,是土壤健康质量的微生物学指标。

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详细内容

 
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤荧光素二乙酸酯(Fluorescein diacetateFDA)水解酶试剂盒说明书
(货号:WS2230F 分光法 48 样)
一、产品简介:
土壤荧光素二乙酸酯(FDA)水解酶与土壤总碳、全氮、全磷等土壤养分指标间关系密切,
与微生物活性间的相关性比其他酶活性更显着,同时也能够很好地反映系统中有机质的转
化和土壤中微生物的活性,是土壤健康质量的微生物学指标。
FDA 是一种无色化合物,在介质中能被许多土壤酶所催化水解,并经脱水反应,产生
酶解终产物—荧光素,该黄色产物在 490nm 处有强吸收峰,通过检测 490nm 处的吸光值
变化即可得出 FDA 水解酶活性。
二、试剂盒组分与配制
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
110mL×1
4℃保存
试剂二
粉体 mg×1
4℃保存
临用加 3mL 丙酮充分溶解备用
标准品
粉体 mg×1
4℃保存
若重新做标曲,则用到该试剂
三、所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、可调式移液器、天平、低温离心机、
恒温水浴锅、丙酮
四、FDA 水解酶(FDA)活性测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本处理:
取新鲜土样风干或 37℃烘箱风干,先粗研磨过 40 目筛备用。
[注]:土壤风干,减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻;
2、上机检测:
① 可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 490nm,蒸馏水调零。
② 在 EP 管中依次加入:
试剂名称(μL
测定管
对照管
土样(g
0.05
0.05
试剂一
1000
1000
试剂二
50
丙酮
50
混匀,37℃反应 1h
丙酮
150
150
混匀, 12000 rpm 离心 10min,取全部上清液转移至 1mL 玻璃
比色皿中,于 490nm 下读取吸光值 AΔAA 测定-A 对照。
【注】:若ΔA 的差值较大,超过 1.5,可以降低土壤取样量,或者反应产物用蒸馏水稀释之后
再检测,则稀释倍数 D 代入计算公式。
五、结果计算:
1、标准曲线:y = 0.1614x + 0.009x 为标准品质量(μg)y ΔA本试剂盒仅供科研使用
2、活性定义:每小时每克土样中产生 1μg 荧光素定义为一个酶活力单位。
FDA 活性(μg/h/g)= (ΔA -0.009)÷0.1614÷W÷T×D= 6.2×(ΔA -0.009)÷W×D
T---反应时间,1h
W---土壤样本实际取样量;
D---稀释倍数,未稀释即为 1
荧光素分子量---332.31
附:标准曲线制作过程:
1 制备标准品母液(5μmol/mL):向标准品 EP 管里面加入 1 mL 丙酮溶解,再加 1 mL
水(母液需在两天内用且-20℃保存)。
2 把母液用试剂一稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 0.2,0.4 ,0.6 , 0.8, 1. μmol/mL。也
可根据实际样本来调整标准品浓度。
3 按照 20μL 标准品+1mL 试剂一+180μL 丙酮的体系来操作,依据结果即可制作标准
曲线。
2

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