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土壤荧光素二乙酸酯(FDA)水解酶试剂盒
价格：￥580
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/2 14:36:11更新时间：2024/7/2 14:36:11
产品摘要：土壤荧光素二乙酸酯(FDA)水解酶与土壤总碳、全氮、全磷等土壤养分指标间关系密切，与微生物活性间的相关性比其他酶活性更显着，同时也能够很好地反映系统中有机质的转化和土壤中微生物的活性，是土壤健康质量的微生物学指标。
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金标层析卡
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤荧光素二乙酸酯（Fluorescein diacetate，FDA）水解酶试剂盒说明书
（货号：WS2230F 分光法 48 样）
一、产品简介：
土壤荧光素二乙酸酯(FDA)水解酶与土壤总碳、全氮、全磷等土壤养分指标间关系密切，
与微生物活性间的相关性比其他酶活性更显着，同时也能够很好地反映系统中有机质的转
化和土壤中微生物的活性，是土壤健康质量的微生物学指标。
FDA 是一种无色化合物，在介质中能被许多土壤酶所催化水解，并经脱水反应，产生
酶解终产物—荧光素，该黄色产物在 490nm 处有强吸收峰，通过检测 490nm 处的吸光值
变化即可得出 FDA 水解酶活性。
二、试剂盒组分与配制
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
110mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉体 mg×1 瓶
4℃保存
临用加 3mL 丙酮充分溶解备用
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂
三、所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、可调式移液器、天平、低温离心机、
恒温水浴锅、丙酮。
四、FDA 水解酶(FDA)活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本处理：
取新鲜土样风干或 37℃烘箱风干，先粗研磨过 40 目筛备用。
[注]：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、上机检测：
① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 490nm，蒸馏水调零。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土样（g）
0.05
0.05
试剂一
1000
1000
试剂二
50
丙酮
50
混匀，37℃反应 1h
丙酮
150
150
混匀， 12000 rpm 离心 10min，取全部上清液转移至 1mL 玻璃
比色皿中，于 490nm 下读取吸光值 A，ΔA＝A 测定-A 对照。
【注】：若ΔA 的差值较大，超过 1.5，可以降低土壤取样量，或者反应产物用蒸馏水稀释之后
再检测，则稀释倍数 D 代入计算公式。
五、结果计算：
1、标准曲线：y = 0.1614x + 0.009：x 为标准品质量(μg)，y 为ΔA。本试剂盒仅供科研使用
2、活性定义：每小时每克土样中产生 1μg 荧光素定义为一个酶活力单位。
FDA 活性(μg/h/g)= (ΔA -0.009)÷0.1614÷W÷T×D= 6.2×(ΔA -0.009)÷W×D
T－－-反应时间，1h；
W－－-土壤样本实际取样量；
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1；
荧光素分子量－－-332.31。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（5μmol/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1 mL 丙酮溶解，再加 1 mL
水（母液需在两天内用且-20℃保存）。
2 把母液用试剂一稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 0.2,0.4 ,0.6 , 0.8, 1. μmol/mL。也
可根据实际样本来调整标准品浓度。
3 按照 20μL 标准品+1mL 试剂一+180μL 丙酮的体系来操作，依据结果即可制作标准
曲线。
2
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