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土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)试剂盒微板法
价格：￥1200
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/2 15:54:41更新时间：2024/9/25 9:21:32
产品摘要：土壤芳基硫酸酯酶（EC 3.1.6.1）来自于土壤微生物，能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫，在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用，是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
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金标渗滤卡
金标层析卡
细胞生物学检测
详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤芳基硫酸酯酶（Solid-aryl sulfatase，S-ASF）试剂盒说明书
（货号：WS6330W 微板法 48 样）
一、产品简介：
土壤芳基硫酸酯酶（EC 3.1.6.1）来自于土壤微生物，能酶促土壤有机硫化物转化为植
物可吸收的无机态硫，在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用，是
反映土壤质量的一个重要生物学指标。
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)能够催化对-硝基苯硫酸钾生成对-硝基苯酚（PNP），后者在
410nm 有特征光吸收。通过测定 410nm 光吸收增加速率，即可计算 S-ASF 酶活性大小。
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
粉剂 mg×2 支
-20℃保存
用甩几下使试剂落入底部，
每支加 1.5mL 试剂二溶解备用。
试剂二
液体 23mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
液 25mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉剂×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、甲苯（自备）和蒸馏水。
四、土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本的制备：
取新鲜土样风干或者 37℃烘箱风干，先粗研磨，过 40 目筛网备用。
【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 410nm。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土样（g）
0.05
0.05
甲苯
10
10
振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置 10min
试剂一
50
试剂二
200
250
混匀， 37℃振荡反应 1h
试剂三
250
250
混匀，室温静置 2min，12000rpm 室温离心 10min，取 200μL 上清液于
96 孔板中，于 410nm 下读取吸光值 A，△A= A 测定- A 对照（每个样
本需做一个自身对照）。
【注】：1.若ΔA 过小，可以增加土样量（如至 0.1g）或延长保温时间（如：2h 或更长），重新调整
的样本量 W 和反应时间 T 需代入计算公式重新计算。
2.若 A 测定超过 1.5，可取 100μL 上清液加 100μL 蒸馏水（相当于稀释 2 倍）于 96 孔板中
检测，或者减少土样量，或者降低保温时间（如：10min），则稀释倍数 D 和重新调整的本试剂盒仅供科研使用
2
样本量 W 和反应时间 T 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 0.1645x - 0.0011；x 为标准品质量（μg），y 为吸光值ΔA。
2、单位定义：每小时每克土样中产生 1μg 对-硝基苯酚（PNP）定义为一个酶活力单位。
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)活性(μg/h/g 土样)=(ΔA+0.0011)÷0.1645÷W÷T
=6.08×(ΔA+0.0011)÷W
T－－-反应时间，1h；
W－－-实际称取干土质量；
PNP 相对分子质量－－-139.11。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（1mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1ml 蒸馏水。
2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5mg/mL。也可根据实际
样本来调整标准品浓度。
3 在 EP 管加入：10μL 标准品+10μL 甲苯+240μL 试剂二+250μL 试剂三，混匀，取 200μL
至 96 孔板中，于 410nm 下读取吸光值。
4 根据结果制作标准曲线。
