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土壤植酸酶(S-Phytase)试剂盒
价格：￥1030
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/2 15:58:23更新时间：2024/12/26 14:28:07
产品摘要：植酸酶（phytase，EC.3.1.3.8）是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸（盐）的一类酶的总称，属磷酸单酯水解酶，能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷，降低粪便中的磷含量，减轻对环境的污染，改善营养成分的吸收和利用，因此具有其广泛的研究和应用价值。
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金标渗滤卡
金标层析卡
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤植酸酶（phytase）试剂盒说明书
（货号：WS7330W 微板法 48 样）
一、产品简介：
植酸酶（phytase，EC.3.1.3.8）是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸（盐）的一类酶
的总称，属磷酸单酯水解酶，能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效
磷，降低粪便中的磷含量，减轻对环境的污染，改善营养成分的吸收和利用，因此具有
其广泛的研究和应用价值。
土壤植酸酶在一定温度和 pH 值条件下，水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物，无
机磷在酸性环境中与钼酸铵反应生成蓝色复合物，通过在 700nm 处检测该有色物质的生
成速率即可计算植酸酶活性大小。
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
规格试剂名称
保存要求
备注
试剂一
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂 mg×1 瓶
4℃保存
临用甩几下使试剂落入底部，再
加入 28mL 试剂一，充分溶解备
用，
试剂三
液体 15mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
粉剂 mg×1 瓶
4℃保存
临用甩几下使试剂落入底部，再
加入 16mL 蒸馏水，充分溶解备
用。
试剂五
粉剂 mg×1 支
4℃保存
临用甩几下使试剂落入底部，再
加入 4mL 蒸馏水，充分溶解备用。
标准品
粉剂 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
反应 mix 的制备（现配现用）：试剂四：五按照 4:1 的比例混合，可根据样本数量配制需要量，
若一次性用完，可把试剂五一次性全部倒入试剂四中，混合备用。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、天平、低温离心机、恒温水浴锅，可调式移液器。
四、土壤植酸酶活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样本情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
取新鲜土样风干或者 30℃烘箱风干，先粗研磨，过 40 目筛备用。
【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 700nm。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土壤
0.1g
0.1g
试剂一
500
试剂二
500
混匀，37℃振荡培养 1 小时本试剂盒仅供科研使用
2
试剂三
100
100
混匀，室温条件下 10000rpm，离心 5min。上清液待测。
③ 显色反应，在 EP 管中依次加入：
上清液
100
100
试剂三
50
50
反应 mix
150
150
混匀，室温（25℃）静置 15min，于 700nm 处读取吸光
值A，△A=A测定-A对照（每个测定管需设一个对照管）。
【注】1. 若显色反应阶段静置后出现浑浊现象，静置结束后可先于室温 10000rpm，离心 5min 后，
再取全部上清液至 96 孔板中，
2. 若△A 值在零附近徘徊，可在 37℃孵育阶段延长反应时间 T(如增至 3h 或更长)，或增加
土壤样本量 W（如增至 0.2g），则改变后的反应时间 T 和 W 需代入公式重新计算。
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 0.4881x + 0.0009，x 是标准品摩尔浓度（μmoL/mL）, y 是△A。
2、酶活定义：37℃条件下，pH5.5 的条件下，每克土样每小时释放出 1μmol 的无机磷为
一个酶活力单位。
土壤植酸酶活性(μmol/h/g 土样)=(△A-0.0009)÷0.4881×V1÷W÷T
=1.23×(△A-0.0009)÷W
V1－－-孵育阶段的反应总体积，0.6mL；
T－－-反应时间，1h；
W－－-样本质量，g；
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（5μmoL/mL）：标准品用 10mL 试剂一溶解。（母液需在两天内用）。
2 把母液用试剂一稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 0.6, 1.2, 1.8, 2.4, 3. μmoL/mL。也
可根据实际样本来调整标准品浓度。
3 依据显色反应阶段测定管的加样体系操作，根据结果即可制作标准曲线。
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