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土壤甘氨酸氨基肽酶(S-GAP)测试盒微板法
价格：￥1070
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/3 14:31:22更新时间：2024/12/26 14:28:07
产品摘要：土壤甘氨酸氨基肽酶（S-GAP）是一类能水解肽链 N-末端为甘氨酸的酶，由土壤微生物分泌。本试剂盒利用土壤甘氨酸氨基肽酶（S-GAP）分解甘氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺，该物质在 405nm 有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算 S-GAP 活性。
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金标渗滤卡
金标层析卡
细胞生物学检测
详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤甘氨酸氨基肽酶（Solid-Glycine Aminopeptidase,S-GAP）
试剂盒说明书
（货号: WS7430W 微板法 48 样）
一、产品简介：
土壤甘氨酸氨基肽酶（S-GAP）是一类能水解肽链 N-末端为甘氨酸的酶，由土壤微生
物分泌。本试剂盒利用土壤甘氨酸氨基肽酶（S-GAP）分解甘氨酸对硝基苯胺生成对硝
基苯胺，该物质在 405nm 有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算 S-GAP 活性。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存条件
备注
试剂一
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂 mg×1 瓶
-20℃保存
临用甩几下，使试剂落入底
部，再加 5.4mL 乙醇混匀溶解。
试剂三
液体 35mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉剂 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、恒温振荡培养箱/水浴锅、可调式移液器、天平。
四、土壤甘氨酸氨基肽酶（S-GAP）活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实
验样本和试剂浪费！
1、样本处理：
取新鲜土样或干土（风干或者 37 度烘箱风干），先粗研磨，过 40 目筛网备用。
【注】土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 405nm。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
空白管（仅做一次）
土样（g）
0.05
0.05
试剂一
400
500
400
试剂二
100
100
充分混匀，37℃培养 2 小时（振荡培养或间隔 20min 手动振荡混匀
几下）
试剂三
300
300
300
混匀，8000rpm 离心 5min（若上清液不澄清可加大离心力），取 200μL
上清液至 96 孔板中，405nm 下读取吸光值 A，△ A= A 测定- A 对照
-A 空白（每个样本做一个自身对照）。
【注】：1.若ΔA 较小，可延长 37℃的孵育时间 T（如增至 4 小时或更长），或增加土样质
量 W（如增至 0.2g）。则改变后的 T 和 W 需代入计算公式重新计算。
2.若测定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1.5，可缩短 37℃的孵育时间 T（如减至 0.5 小时或更短）。
则改变后 T 需代入计算公式重新计算。或对后一步的待检测上清液（包括测定管、对照管
和空白管）同时用蒸馏水进行稀释，稀释倍数 D 代入计算公式。本试剂盒仅供科研使用
2
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 0.0077x - 0.0024；x 为标准品摩尔质量（nmol），y 为△A。
2、单位定义：每小时每克土样生成 1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-GAP(nmol/h/g 土样)=(ΔA+0.0024)÷0.0077÷W÷T×D=65×(ΔA+0.0024)÷W×D
T－－-反应时间，2h；
W－－-土壤样本实际取样量，g。
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（10μmol/mL）：临用甩几下或离心，使粉体落入底部，加入 0.5mL
乙醇，涡旋震荡溶解后再加入 0.5mL 的蒸馏水混匀，得到 10μmol/mL 备用。
2 把母液用蒸馏水稀释成以下浓度：0,0.4,0.8,1.2,1.6, 2μmol/mL。也可根据实际样本来
调整标准品浓度。
3 在 EP 管依次加入：50μL 标准品+450μL 试剂一+300μL 试剂三，混匀，取 200μL 至
96 孔板中，于 405nm 下读取吸光值，根据结果制作标准曲线。
