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土壤β-半乳糖苷酶(S-β-GAL)试剂盒
价格：￥610
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：24T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/3 14:38:35更新时间：2024/7/30 13:59:33
产品摘要：土壤β-半乳糖苷酶（β-GAL，EC 3.2.1.23)又称β-D-半乳糖苷半乳糖基转移酶，参与土壤中碳水化合物的水解。
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤β-半乳糖苷酶（Solid-β-Galactosidase，S-β-GAL）试剂盒说明书
（货号：WS8430F 分光法 24 样）
一、产品简介：
土壤β-半乳糖苷酶（β-GAL，EC 3.2.1.23)又称β-D-半乳糖苷半乳糖基转移酶，参与土
壤中碳水化合物的水解。
本试剂盒提供一种简单，灵敏，快速的测定方法，β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳
糖苷生成对-硝基苯酚（PNP），后者在405nm有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来
计算β-GAL活性。
二、试剂盒的组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
粉剂 mg×1 瓶
-20℃保存
临用加入 4.5mL 蒸馏水，充分溶解
备用，用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂二
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉剂×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂
三、所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、台式离心机、恒温振荡培养箱/水浴锅、
可调式移液器、天平。
四、土壤β-半乳糖苷酶（S-β-GAL）酶活检测：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实
验样本和试剂浪费！
1、样本处理：
取新鲜土样或干土（风干或者 37 度烘箱风干），先粗研磨，过 40 目筛网备用。
【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
2、测定步骤：
① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 405nm，蒸馏水调零。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
空白管（仅做一次）
土样（g）
0.1
0.1
试剂一
150
150
蒸馏水
150
试剂二
300
300
300
混匀， 37℃振荡反应 1h
试剂三
350
350
350
混匀，12000rpm 室温离心 10min，取全部上清液转移至 1mL 玻璃比
色皿（光径 1cm）中，405nm 下读取吸光值 A，△A=A 测定- A 对照-A
空白（每个样本做一个自身对照）。
【注】：1.若ΔA 在零附近徘徊，可延长 37℃的孵育时间 T（如增至 4 小时或更长），或增加土样质
量 W（如增至 0.2g）。则改变后的 T 和 W 需代入计算公式重新计算。
2.若测定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1.5，可缩短 37℃的孵育时间 T（如减至 0.5 小时或更短）。
则改变后 T 需代入计算公式重新计算。或对后一步的待检测上清液（包括测定管、对照管
和空白管）同时用蒸馏水进行稀释，稀释倍数 D 代入计算公式。本试剂盒仅供科研使用
2
五、结果计算：
1、标准曲线方程为 y = 0.1461x + 0.0087；x 为标准品质量（μg），y 为△A。
2、单位定义：每小时每克土样中产生 1nmol 对-硝基苯酚（PNP）定义为一个酶活单位。
S-β-GAL 活力(nmol/h/g 土样)=(ΔA-0.0087)÷0.1461÷Mr×103÷W÷T×D
=49.2×(ΔA-0.0087)÷W×D
T－－-反应时间，1h；
W－－-实际称取土样质量，g；
Mr－－- PNP 相对分子质量，139.11；
D－－-稀释倍数，未稀释即为 1。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（1mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1mL 蒸馏水。
2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5 mg/mL。也可根据实际
样本来调整标准品浓度。
3 在 EP 管依次加入：20μL 标准品+130μL 蒸馏水+300μL 试剂二+350μL 试剂三，混匀，
全部上清液转移至 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中，于 405nm 下读取吸光值。
4 根据结果制作标准曲线。
