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土壤精氨酸脱氨酶活性测定试剂盒微板法
价格：￥560
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/3 15:23:44更新时间：2024/12/26 14:28:07
产品摘要：氮素是限制植物生长发育的主要营养元素，土壤氮素是植物氮素营养的主要来源。其中土壤精氨酸脱氨酶也与土壤中氮转化有着密切关系。
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金标渗滤卡
金标层析卡
细胞生物学检测
详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
土壤精氨酸脱氨酶活性测定试剂盒说明书
（货号：WS0530W 微板法 48 样）
一、产品简介：
氮素是限制植物生长发育的主要营养元素，土壤氮素是植物氮素营养的主要来源。
其中土壤精氨酸脱氨酶也与土壤中氮转化有着密切关系。
本试剂盒利用精氨酸脱氨酶水解精氨酸生成NH3-N，该产物在强碱性介质中与次氯酸盐
和苯酚反应，生成水溶性染料靛酚蓝，通过检测生成的有色物质在630nm的大光吸收峰，
进而得出土壤精氨酸脱氨酶活力大小。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格试剂名称
保存要求
备注
试剂一
粉剂 mg×2 瓶
4℃保存
临用每瓶加入 18mL 蒸馏水，充分溶
解备用，用不完的试剂仍 4℃保存；
试剂二
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
液体 6mL×1 瓶
4℃保存
避光保存。
试剂四
液体 3mL×1 瓶
4℃保存
试剂五
A：液体 3.5mL×2 瓶
B：液体μL×1 支
4℃保存
临用取 30μL 的 B 液进一瓶 A 液中，
混匀后作为试剂五使用。混匀后的试
剂五一周内用完。
标准品
液体 1 mL×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、水浴锅或恒温培养箱、离心机、可调式移液器、蒸馏水。
四、土壤精氨酸脱氨酶活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本的制备：
取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干，先粗研磨，过 40 目筛网，备用。
2、上机检测：
① 培养：取 EP 管依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
土样(g)
0.5
0.5
试剂一
600
蒸馏水
600
混匀，放入 37℃水浴锅或恒温培养箱中孵育 3 小时
试剂二
600
600
震荡提取 30min，8000rpm，25℃离心 5min，取上清液。
② 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 630nm。
③ 显色反应：在 96 孔板中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
上清液
15
15本试剂盒仅供科研使用
2
蒸馏水
45
45
试剂三
60
60
试剂四
30
30
试剂五
60
60
混匀，37℃放置 20min 后，于 630nm 读取吸光值 A，
ΔA=A 测定管-A 对照管（每个样本做一个自身对照）。
【注】1. 试剂三和四和五需分开加，不能事先混匀。
2. 若ΔA 值较小，可增加 37℃孵育时间 T（如由 3 小时增至 6 小时或更多）或在显色反应阶
段增加上清液量 V1(如增至 30μL，则蒸馏水体积相应减少)；则改变后的 T 和 V1 需代入
计算公式重新计算。
3. 若 A 测定的值大于 1.5，可在显色反应阶段减少上清液的量 V1(如减至 5μL，则蒸馏水体
积相应增加)；则改变后的上清液体积 V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、标准曲线：y = 5.0935x - 0.0031；x 为标准品质量（μg），y 为吸光值ΔA 。
2、土壤酶活定义：每天每克土样中产生 1μg 的 NH3-N 定义为一个酶活力单位。
土壤精氨酸脱氨酶活力(μg/d/g 土样)=(ΔA+0.0031)÷5.0935×(V÷V1)÷W÷T
=125.7×(ΔA+0.0031)÷W
V－－-反应总体积，1200μL；
V1－－-显色反应中上清液体积，15μL；
T－－-反应时间，3h=1/8d；
W－－-土壤样本实际取样质量，g。
附：标准曲线制作过程：
1 把标准品母液（1mg/mL），用蒸馏水稀释成以下浓度梯度的标准品：0，2，4，6，8，
10. μg/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
2 在显色反应阶段，按照测定管加样表操作，依据结果即可制作标准曲线。
热门标签：土壤精氨酸脱氨酶活性测定试剂盒微板法
