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谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)试剂盒
价格：￥160
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2024/7/3 17:06:53更新时间：2024/12/26 14:28:07
产品摘要：丙氨酸氨基转氨酶，旧称谷丙转氨酶，缩写为 ALT 或 GPT（EC 2.6.1.2）广泛存在于动植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要作用。
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质粒
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对照品/标准品
抗体
Axygen耗材
细胞
金标试纸条
金标渗滤卡
金标层析卡
细胞生物学检测
详细内容
本试剂盒仅供科研使用
1
谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)试剂盒说明书
（货号：WS3240F 分光法 48 样）
一、产品简介：
丙氨酸氨基转氨酶，旧称谷丙转氨酶，缩写为 ALT 或 GPT（EC 2.6.1.2）广泛存在于
动植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要
作用。
谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，
生成丙酮酸和谷氨酸；加入 2,4-二硝基苯肼溶液，不仅终止上述反应，而且与丙酮酸反应
形成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色。通过在 520nm 读取吸光值并计算出该
酶活力大小。
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 5mL×1 支
4℃保存
试剂二
液体 6mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
液体 6mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
三、所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、
可调式移液器、研钵。
四、谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)活性测定：
建议正式实验选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、 样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。12000rpm，4℃离心 10min，取上
清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例提取。
2 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，
超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；12000rpm，
4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例提取。
③ 血清（浆）样本：直接检测。若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机测定：
① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 520nm，蒸馏水调零。
② 可先做 2 个样本预测定，熟悉操作过程，并依据测出的吸光值 A 是否超出标准曲线的
线性范围来做调整。
3
在 1.5mLEP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
样本
20本试剂盒仅供科研使用
2
试剂一
10
10
试剂二
60
60
混匀，于 37℃孵育 30min
试剂三
60
60
样本
20
混匀，于 37℃孵育 10min
试剂四
600
600
混匀，25℃孵育 10min，全部液体转移至 1mL 玻璃比色皿
中，于 520nm 处测定吸光值 A，
△A=A 测定-A 对照（每个样本做一个自身对照）。
【注】1.若 A 测定超过 1.5，可降低样本量 V1（如 10μL），试剂一相应增加。则改变后的加样
体积 V1 需代入计算公式重新计算。
2.若△A 的值在零附近徘徊，则可增加样本量 V1（如 30μL，则试剂一相应减少），或增加
样本取样质量（W），则改变后的加样体积 V1 和取样质量 W 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 0.0232x + 0.0022，x 为标准品摩尔质量（nmol）；y 是ΔA。
2、按样本蛋白浓度计算：
酶活定义：每毫克组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。
GPT/ALT(nmol/min/mg prot)=[(ΔA-0.0022)÷0.0232]÷(V1×Cpr)÷T=71.8×(ΔA-0.0022)÷Cpr
3、按样本鲜重计算：
酶活定义：每克组织每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。
GPT/ALT(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔA-0.0022)÷0.0232]÷(W×V1÷V)÷T=71.8×(ΔA-0.0022)÷W
4、按细菌或细胞密度计算：
酶活定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。
GPT/ALT(nmol/min/104 cell)=[(ΔA-0.0022)÷0.0232]÷(500×V1÷V)÷T=0.144×(ΔA-0.0022)
5、血清（浆）活力计算:
酶活定义：每毫升血清（浆）每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。
GPT/ALT(nmol/min/mL)=[(ΔA-0.0022)÷0.0232] ÷V1÷T=71.8×(ΔA-0.0022)
V－－-提取液体积，1 mL；
V1－－-反应体系中样本体积，0.02mL；
T－－-反应时间，30 min； W－－-样本质量，g；500－－-细胞或细菌总数，500 万；
Cpr－－-样本蛋白质浓度，mg/mL ；建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（20μmol/mL）：加 1mL 蒸馏水溶解标准品，充分混匀。
2 把母液稀释成以下浓度：0, 0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2μmol/mL。也可根据实际来调整浓度。
3 30μL 标准品+60μL 试剂二+60μL 试剂三，混匀，于 37℃孵育 10min ；再加 600μL
试剂四，混匀，25℃孵育 10min，于 520nm 处测定吸光值 A，依据结果即可制作标
准曲线。
