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胃蛋白酶试剂盒微板法
价格：￥510
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号：48T 原产地：中国大陆 发布时间：2012/8/20 16:30:09更新时间：2024/10/29 9:36:37
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒。品种多，质量好，灵敏度高，涉及的品牌有原装/分装等不同价格档次的盒子。可以带检测（为您节省时间）具体价格请来电咨询
产品完善度： 访问次数：235
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
胃蛋白酶（Pepsin）试剂盒说明书
(货号：WS0121W 微板法 48 样)
一、产品简介：
胃蛋白酶（Pepsin）是一种消化性蛋白酶，由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白
质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等
症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解生成含酚的氨基酸，含酚的氨基酸与福林酚反应后显蓝
色；其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存条件
备注
提取液
液体 50mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 5mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉体 mg×2 瓶
4℃保存
临用甩几下使粉体落入底部，每瓶
再加 13mL 蒸馏水溶解备用。
试剂三
液体 15mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体 3mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
临用加 2mL 提取液，再用蒸馏水稀
释 10 倍，即为 0.05mg/mL 酪氨酸。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液器、天平、研钵、冰和蒸馏水。
四、胃蛋白酶活性测定：
1、样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。4℃×3500rpm 离心 5min，取上清，
置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例
进行提取
② 液体样本：液体用提取液按照 1:1 的比例混合稀释后，4℃×3500rpm，离心 5min，
取上清液检测。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 680nm。
② 所有试剂解冻至室温。
③ 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
样本
50
50
试剂一
50本试剂盒仅供科研使用
2
37℃孵育 5min
试剂二
250
250
37℃孵育 10min
试剂一
50
37℃孵育 5min 后，3000rpm 离心 5min，上清液待测。
④ 显色反应，在 EP 管中：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
标准管
（仅做一次）
空白管
（仅做一次）
上清液
30
30
标准品
30
提取液
30
试剂三
150
150
150
150
试剂四
30
30
30
30
37℃孵育 20min 后（若浑浊则室温 3000rpm 离心 5min），取 200μL 至 96
孔板中，于 680nm 处测定，读取吸光值 A。ΔA=A 测定-A 对照（每个样
本做一个自身对照）。
【注】1. 若ΔA 在零附近徘徊，可以延长反应时间 T（如 37℃孵育 10min 延长至 20min）或增加样本
量 V1（如增至 100μL，则试剂二相应减少），则改变后的反应时间 T 和样本量 V1 需代入计
算公式重新计算。
2. 若 A 测定值大于 1.5，可以减少样本量 V1（如减至 20μL，用提取液相应补充），则改变后的
样本量 V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、按样本蛋白浓度计算：
酶活定义：37℃每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1μg 酪氨酸为 1 个酶活单位(U)。
胃蛋白酶（U/mg prot）=[ΔA÷（A 标准-A 空白）×C 标准×V2]÷ (V1×Cpr) ÷T
=35×ΔA÷（A 标准-A 空白）÷Cpr
2、按样本鲜重计算：
酶活定义：37℃每 g 组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1μg 酪氨酸为 1 个酶活单位(U)。
胃蛋白酶（U/g 鲜重）=[ΔA÷（A 标准-A 空白）×C 标准×V2]÷(W×V1÷V) ÷T
=35×ΔA÷（A 标准-A 空白）÷W
3、液体 LAP 活力的计算:
酶活定义：37℃每毫升液体每分钟催化血红蛋白水解生成1μg酪氨酸为1个酶活单位(U)。
胃蛋白酶（U/mL）=[ΔA÷（A 标准-A 空白）×C 标准×V2]÷V1×2÷T
=70×ΔA÷（A 标准-A 空白）
V－－-加入提取液体积，1 mL；
V1－－-加入样本体积，0.05mL；
V2－－-第③歩反应总体积，0.35mL；
T－－-反应时间，10min；
C 标准－－-50μg/mL；
W－－-样本质量，g；
Cpr－－-样本蛋白质浓度，mg/mL；建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒
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