细胞培养无菌操作基本技术_技术文章_上海恒远生物科技有限公司

1.实验前，无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌，用70%酒精擦拭无菌操作台面，并开启无菌操作台风机运转10分钟后，才可开始实验操作，每次操作只处理一株细胞，以免造成细胞交叉污染，实验结束后,将实验物品带出工作台，如需要继续进行下一个实验，则用70%酒精擦拭无菌操作台面，再让无菌操作台风机运转10分钟后，才可进行下一个实验操作

2.无菌操作工作区域应保持清洁与宽敞，必要物品，如试管架，移液器或吸管头等可以暂时放置，其它实验用品用完后应及时移出，以利气体流通，实验用品要用70%酒精擦拭后才能带入无菌操作台内，实验操作应在操作台中央无菌区域内进行，勿在边缘非无菌区域操作

3.小心取出无菌实验用品，避免造成污染，切勿碰触吸管与吸头头部或容器瓶口，不要在打开的容器正上方操作实验，容器打开后，用手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放在台面上

4.工作人员应注意自身的安全,必须穿戴实验衣与手套后才进行实验，对于来自人源性或病毒感染的细胞株应特别小心，并选择适当等级的无菌操作台(至少两级)，操作过程中，应避免引起气溶胶的产生，小心有毒性试剂，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐物品伤人等

5.定期检查下列项目，CO2钢瓶内的CO2压力，CO2培养箱内的CO2浓度，温度，及水盘是否有污染，无菌操作台内气流压力是否正常，定期更换紫外灯管及HEPA过滤器滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000小时/HEPA）

原创作者：上海恒远生物科技有限公司

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