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足不出户,带您认识实验室常用细胞
点击次数：13081 发布时间：2020/2/24 15:13:03
实验室常用细胞简介，有助于了解基本的细胞信息，非常有用！
一、CHO-K1细胞
CHO-K1细胞是实验中非常常用的一个细胞株，在生物制药中使用也非常广泛。该细胞株培养条件简单，贴壁强度适中，比较容易转染，很适合用它来研究一般哺乳动物基因的功能。
来源：Cricetulus griseus (中国仓鼠) 卵巢
形态：表皮细胞
生长特性：贴壁
注释：CHO-K1由CHO衍生而来，CHO是T. T. Puck 在1957年从一只成年中国仓鼠卵巢获得的。
培养液：Ham＇s F12K （含2 mM L-谷氨酰胺，1.5 g/L NaHCO3）， 10% 胎牛血清。
传代：吸去培养液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：4到1：8为宜，传代期间培养液更换1-2次）
冻存：95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。
二、293细胞
293细胞比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株：293T/17的转染效率更高，成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。
293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失，从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中，就需要让细胞沉降几天时间，因为大量细胞会漂浮在培养液里。
来源：人体肾脏
形态：上皮细胞
生长特性：贴壁
注释：该细胞含腺病毒5 DNA 。
培养液： MEM（ 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle＇s BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠）， 10% 马血清（热灭活）。
传代： 吸去培养液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：2到1：4为宜，传代期间培养液2-3天更换1次）
冻存：95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。
三、vero细胞
Vero细胞被成功的用来培养狂犬病疫苗、乙脑疫苗等多种疫苗，在非典期间又为研究冠状病毒做出贡献，在医药研究中广泛应用。
来源： 非洲绿猴肾细胞
形态：上皮细胞
生长特性：贴壁
注释：该细胞是日本千叶大学的Y. Yasumura和Y. Kawakita于1962年3月27日从一只正常的成年非洲绿猴肾组织培养出来的。
培养液：MEM（ 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle＇s BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠）， 10%胎牛血清
传代：吸去培养液。用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1:3至1:6为宜，传代期间培养液每周更换2-3次）
冻存： 95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。
四、NIH-3T3细胞
NIH-3T3细胞在实验室常用来做转染及基因表达的研究。易感病毒有鼠肉瘤病毒和鼠白血病毒。
来源： Mus musculus（小家鼠）胚胎
形态：成纤维细胞样
生长特性：贴壁
注释：为得到适合转染得细胞株，NIH-3T3细胞至少连续克隆过5次。NIH-3T3细胞容易转染DNA，鼠痘病毒阴性。
培养液：DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、4.5g/L葡萄糖、1.5g/L碳酸氢钠），10%小牛血清
传代：吸去培养液。（不要让细胞长满培养器皿，长满80%为宜）用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以3-5x103/cm2为宜，传代期间培养液每周更换2次）
冻存： 95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。
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