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ELISA实验常被问到的问题
点击次数:13043 发布时间:2020/4/14 11:44:52
在操作酶联免疫试剂盒实验时,有很多技术问题是比较常见且易错的,而就是这些问题困惑不少实验操作员。上海恒远根据技术部的问题处理总结,整理出了几个比较常见的问题,跟着小编一起往下看吧:
一、为什么必须设置复孔?
为获得更准确的实验结果,强烈建议标准品及样本进行复孔检测,因为复孔检测可以:计算平均值,确保实验结果更准确;解决实验中误操作造成的跳孔现象;计算CV值,对实验的操作和试剂盒的精密度进行评估。
二、重复性差怎么办?
1.样品数量不一,加样时间长短不一(恒远来解决:重复某一样品时,加样时间尽可能与次接近)。
2.酶标仪滤光片不对或输入波长不对(恒远来解决:TMB显色用450/630波长)。
3.酶标仪测定重复性差(恒远来解决:校对酶标仪)。
三、为什么标准曲线线性较差?
需要按照推荐方式保存标准品;溶解标准品之前需短暂离心,彻底收集粉末;确保标准品完全溶解和混匀,然后再进行后续的系列稀释步骤,确保每一步都充分混匀且精确移液;显色的恰当终止;选择合适的数学拟合方程绘制标准曲线。
四、为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作?
温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有试剂平衡至室温,包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。
今天的资讯内容就到这里了,上海恒远生物为您提供的酶联免疫试剂盒安全可靠,规格有96T和48T两种,主要代理品牌有美国非常知名的BIM、R&D、TSZ,欢迎您的来电咨询。我司本着服务科研,以质量求生存,以信誉求发展的精神,精益求精,力求做到更好。全体员工孜孜不倦为国内科研事业单位以及高校等提供优质的产品服务!本公司优质elisa试剂盒具有质量可靠,灵敏度好,更具有免费代测及技术指导服务,欢迎科研者来电详询!
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