使用目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中骨粘连蛋白(ON)含量。

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨粘连蛋白(ON)水平。用纯化的人骨粘连蛋白(ON)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入骨粘连蛋白(ON)，再与HRP标记的骨粘连蛋白(ON)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的骨粘连蛋白(ON)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人骨粘连蛋白(ON)浓度。

标本要求

1． 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2． 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

注意事项

1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物请避光保存。

7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9． 本试剂不同批号组分不得混用。

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原创作者：上海恒远生物科技有限公司