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上海恒远生物科技有限公司 主营产品:猪elisa试剂盒,鸡elisa试剂盒,猴elisa试剂盒,兔elisa试剂盒,裸鼠elisa试剂盒,仓鼠elisa试剂盒,豚鼠elisa试剂盒

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当前位置:易推广>上海恒远生物科技有限公司>资料下载>犬细小病毒抗体(CPV Ab)酶联免疫试剂盒使用说明书

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犬细小病毒抗体(CPV Ab)酶联免疫试剂盒使用说明书

点击次数: 1012发布时间:2011/3/7

  • 上 传 者: shhybio
  • 上传时间: 2012/11/16 15:29:40
  • 文件大小: 145KB
  • 文件类型: jpg
  • 所属分类: 其它资料
  • 下载次数: 142次
  • 查看次数: 1012

资料简介:

犬细小病毒抗体(CPV Ab)酶联免疫试剂盒  Elisa试剂盒现货代测|ELISA试剂盒——全国包邮送货上门

规格:48T/96T(定性定量分析检测)

Elisa试剂盒应用范围:科研试验用检测试剂

ELISA实验步骤,样本处理及要求(液体类标本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等),请参考Elisa试剂盒说明书——点此索取

免责声明

1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

检测范围: 96T
1ng/L - 32ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定犬血清、血浆及相关液体样本中细小病毒抗体(CPV Ab)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中犬细小病毒抗体(CPV Ab)水平。用纯化的犬
细小病毒抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入细小病毒抗体(CPV
Ab),再与HRP 标记的细小病毒抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤
后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的
黄色。颜色的深浅和样品中的细小病毒抗体(CPV Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长
下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中犬细小病毒抗体(CPV Ab)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(64ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
犬细小病毒抗体(CPV Ab)酶联免疫试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
32ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
16ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
8ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
4ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。

试剂的准备

 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

犬细小病毒抗体(CPV Ab)酶联免疫试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

犬细小病毒抗体(CPV Ab)酶联免疫试剂盒性能

1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2.  灵敏度:检测浓度小于1.0 IU/L。

3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.  有效期:6个月 

结果判断

 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

 

 

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