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使用ELISA试剂盒的具体操作步骤

点击次数: 361发布时间:2011/3/7

  • 上 传 者: 上海恒远生物科技有限公司
  • 上传时间: 2014/3/27 13:34:40
  • 文件大小: 65KB
  • 文件类型: png
  • 所属分类: 应用方法
  • 下载次数: 123次
  • 查看次数: 361

资料简介:

 使用elisa试剂盒的具体操作步骤


1、标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4、配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 
7、温育:操作同3。
8、洗涤:操作同5。
9、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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