我们常说到的elisa就是是酶联接免疫吸附剂测定，它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。而在elisa实验中常常会出现一些问题，那么今天我们就来说在elisa实验中*可能出现的问题以及解决的方法。

        我们在试验中可能会出现所有孔都没有显色，那么原因就有可能是微孔加入抗体后，洗板不彻底，微孔中存在游离的抗体。也可能是用错试剂。您在想想是不是在操作中忘记加酶或抗体。       
 所有孔都没有显色的问题解决方法：       
1、检查洗板器械，比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。         
2、在加样前，要看清瓶签。         
3、严格按说明书操作步骤进行实验，确保每步都到位。         
您有没有遇见过所有孔显色偏低的现象？那么气原因就有可能是微孔加入抗体后，洗板不彻底，微孔中存在游离的抗体。或者是洗板不干净。抗体污染了酶结合物等其它试剂。温度没达到要求也会受到相应的实验影响。还有可能是每孔加入的试剂量低于说明书要求量。   
所有孔显色偏低的问题解决办法：    
（1）手工加蒸馏水洗板时，要避免吸头接触微孔，常更换新的蒸馏水。   
（2） 洗板时要确保每孔都注满蒸馏水（约400ul），且至少洗板五次。     
（3）严格按说明书要求操作，每次取样要更换吸头。     
（4） 控制孵育温度在25℃。      
（5） 加样器吸头安放牢固避免吸样不足，加样时务必将吸头内液体打尽。 
   
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