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面粉过氧化苯甲酰速测盒
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质量-(面粉过氧化苯甲酰速测盒)
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培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
适应:科研实验
保存温度: 2~8°
规格:100批次/盒
96T指可以做94个标本,2个标准对照
48T指可以做47个标本,1个标准对照
96T-84个样本
48T-42个样本
操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。多年专业酶免服务,质量,含税含运费,期待与您的合作!
测试步骤:
(1)仔细切开覆盖在孔板上的箔片,从微孔板底部用手指轻轻顶出所用的孔板。注意不要损伤不使用的孔板上的条或孔,而且应将其立即用塑料袋密封放入2-8℃的冰箱保存,以防止琼脂变干;
(2)揭开覆盖在孔板上的箔片,每孔加入80mL牛奶样品。并分别加入80mL的阴性和阳性质控,加入样品时应避免交叉污染;
(3)用密封胶将孔板密封,置于65℃恒温箱或水浴箱中孵育直到阴性质控转化成浅黄绿色(参照每批质量检测报告,大约需要1小时45分钟)。
注:如果是采用水浴进行孵育的话,请注意避免水进入微孔。样品孵育时间不能超过质检报告中说明的时间,否则检测灵敏度会下降。
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